核因子-kB中介的TNF-α與胃癌細(xì)胞侵襲力相關(guān)性.pdf

1、胃癌細(xì)胞的侵襲轉(zhuǎn)移是導(dǎo)致胃癌患者預(yù)后極差的主要原因，積極開展對腫瘤浸潤轉(zhuǎn)移的分子機(jī)制研究具有重要的現(xiàn)實(shí)意義。目前研究證實(shí)腫瘤細(xì)胞在增殖、轉(zhuǎn)移過程中受到腫瘤微環(huán)境的影響，其侵襲力顯著增強(qiáng)，即轉(zhuǎn)移中的腫瘤“分子進(jìn)化”過程。腫瘤微環(huán)境是由纖維細(xì)胞、滲透性免疫細(xì)胞、血液與淋巴管系統(tǒng)、細(xì)胞外基質(zhì)共同構(gòu)成，其中常見的細(xì)胞因子有白介素1、白介素8、腫瘤壞死因子-α(TNF-α)等。TNF-α是作為微環(huán)境中炎癥因子的典型代表，其作用受到日益關(guān)注。近年來

2、在卵巢癌、人類黑色素瘤等腫瘤細(xì)胞上被證實(shí)具有促腫瘤浸潤的作用，但其促進(jìn)腫瘤細(xì)胞侵襲的分子機(jī)制還不十分清楚。本實(shí)驗(yàn)采用體外培養(yǎng)人胃癌細(xì)胞株SGC-7901，構(gòu)建侵襲小室，并選擇核轉(zhuǎn)錄因子(NF-kB)和蛋白水解酶之一的尿激酶型纖溶酶原激活物(uPA)做為檢測指標(biāo)，探討TNF-α促進(jìn)胃癌細(xì)胞侵襲的相關(guān)機(jī)制。 目的：探討腫瘤壞死因子(TNF-α)誘導(dǎo)胃癌細(xì)胞侵襲力的相關(guān)機(jī)制。 方法：體外培養(yǎng)人胃癌細(xì)胞株SGC-7901，采用免

3、疫組化方法檢測其在TNF-α不同濃度、時間誘導(dǎo)下的NF-kB活性、uPA蛋白表達(dá)強(qiáng)度；采用噻唑藍(lán)(MTT)比色法檢測SGC-7901細(xì)胞在不同濃度的TNF-α、PDTC(吡咯烷二硫代氨基甲酸鹽，NF-kB特異性抑制劑)孵育下的細(xì)胞增殖情況；構(gòu)建侵襲小室，檢測不同濃度TNF-α對SGC-790l細(xì)胞侵襲力影響，并用PDTC預(yù)先處理細(xì)胞后，檢測其對細(xì)胞侵襲力的改變。 結(jié)果：單因變量方差分析表明：影響SGC-7901 NF-kB p6

4、5、uPA表達(dá)的兩因素：TNF-α誘導(dǎo)“不同時間”和“不同濃度”無交互效應(yīng)(修正模型SS=處理組間SS+配伍組間SS)，隨著TNF-α濃度的增加和時間延長，SGC-7901細(xì)胞NF-kB活性明顯增強(qiáng)，90min為高峰；TNF-a明顯上調(diào)SGC-7901細(xì)胞中的uPA蛋白表達(dá)水平；一定范圍濃度的TNF-α、PDTC對SGC-7901細(xì)胞增殖無明顯影響；隨著TNF-α濃度增加SGC-7901細(xì)胞侵襲數(shù)也隨之增加，具有明顯濃度依賴性(TNF-

5、α 5、10、20ng/ml vs 0ng/ml：84.33±3.786、108.33±6.110、121.330±4.163 vs 63.330±4.933，F(xiàn)=126.282)，PDTC明顯抑制TNF-α誘導(dǎo)的SGC-7901細(xì)胞侵襲力(42.330±4.041 vs 63.330±4.933,F=126.282)。 結(jié)論：TNF-α能夠增強(qiáng)胃癌細(xì)胞的侵襲力，其增強(qiáng)的侵襲力可能是通過NF-kB信號轉(zhuǎn)導(dǎo)路徑，激活uPA等蛋白水