胃癌細(xì)胞中瘦素與MMP-9的相關(guān)性研究.pdf

1、目的：
　　通過瘦素（Leptin）影響胃癌細(xì)胞（SGC7901）中基質(zhì)金屬蛋白酶9（matrix metalloprotein,MMP-9）基因mRNA轉(zhuǎn)錄水平的差異的相關(guān)分析，旨對胃癌細(xì)胞細(xì)胞中瘦素（Leptin）與基質(zhì)金屬蛋白酶9（MMP-9）的相關(guān)性進(jìn)行闡述，并且期待能夠為胃癌的相關(guān)研究及臨床治療提供相應(yīng)的理論依據(jù)。
　　方法：
　　以含10％胎牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基作為人胃癌細(xì)胞系SGC7901的培養(yǎng)

2、基，并放置在37攝氏度、5%CO2條件下常規(guī)培養(yǎng)。取對數(shù)期生長的人胃癌細(xì)胞（SGC7901）經(jīng)胰蛋白酶消化后捶打混勻后，逐一均勻加入到培養(yǎng)皿24個孔道中，然后將基因重組人源性瘦素以三蒸蒸餾水溶解均勻后加入到培養(yǎng)皿24個孔道中，此實驗中以基因重組人源性瘦素濃度分別設(shè)8個組分別為：對照組、10ng組、50ng組、100ng組、150ng組、200ng組、250ng組、300ng組，每個組別設(shè)有三個重復(fù)孔道。放置到5%CO2、37攝氏度條件下

3、常規(guī)培養(yǎng)24小時。之后運用ⅠReal-Time PCR方法檢測人胃癌細(xì)胞（SGC7901）樣本在不同濃度瘦素（Leptin）影響下MMP-9目的基因mRNA轉(zhuǎn)錄水平的變化情況。應(yīng)用SPSS統(tǒng)計軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行分析得出各組不同濃度下基質(zhì)金屬蛋白酶9（MMP-9）目的基因mRNA轉(zhuǎn)錄水平的中位數(shù)（MUI）及均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差，按照2-△△ct相對定量計算公式對Real-Time PCR原始檢測結(jié)果進(jìn)行計算，從而得出各樣品的目的基因相對定量結(jié)果，即而

4、得出相對于對照組而言，其他各個樣品目的基因mRNA轉(zhuǎn)錄水平的相對差異，之后采用Kruskal-Wallis H（秩和檢驗）等統(tǒng)計學(xué)方法進(jìn)行相應(yīng)數(shù)據(jù)分析。
　　結(jié)果：
　　運用Kruskal-Wallis H統(tǒng)計學(xué)方法，對以上數(shù)據(jù)進(jìn)行比較，檢驗標(biāo)準(zhǔn)為P<0.05，其結(jié)果具有統(tǒng)計學(xué)意義，其結(jié)果顯示瘦素濃度（250ng、300ng）組均與對照組有差別，同時瘦素濃度（250ng、300ng）組均與瘦素濃度（10ng）組有差別，并且按

5、照2-△△ct相對定量計算公式對Real-Time PCR原始檢測結(jié)果進(jìn)行計算，并得出各樣品的目的基因相對定量結(jié)果：1對照組的PPARr基因相對表達(dá)量：1.333316、0.977019、0.767652；210ng組的PPARr基因相對表達(dá)量：0.760776、1.194642、0.893853；350ng組的PPARr基因相對表達(dá)量:1.180527、0.822674、0.689638；4100ng組的PPARr基因相對表達(dá)量：0.

6、878753、0.75578、0.722084；5150ng組的PPARr基因相對表達(dá)量：0.706569、0.627592、0.743446；6200ng組的PPARr基因相對表達(dá)量：0.723143、0.515884、0.524015；7250ng組的PPARr基因相對表達(dá)量：0.603967、0.481726、0.338198；8300ng組的PPARr基因相對表達(dá)量：0.537623、0.287232、0.420464。通過對以

7、上PPARr基因相對表達(dá)量進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析得出250ng組的PPARr基因相對表達(dá)量與對照組及10ng組的PPARr基因相對表達(dá)量的差異性有統(tǒng)計學(xué)意義、300ng組的PPARr基因相對表達(dá)量與對照組及10ng組的PPARr基因相對表達(dá)量的差異性有統(tǒng)計學(xué)意義。并對對以上數(shù)據(jù)繪制出柱狀圖，可見隨著各個樣品中所加瘦素（Leptin）量的增加基質(zhì)金屬蛋白酶9（MMP-9）呈下降趨勢（如圖）。通過對樣品中MMP-9的基因相對表達(dá)量的統(tǒng)計學(xué)分析及描繪

8、出的柱狀圖中顯示，在基因水平，人胃癌細(xì)胞（SGC7901）中Leptin濃度的變化與MMP-9的目的基因mRNA轉(zhuǎn)錄水平成負(fù)相關(guān)。
　　結(jié)論：
　　1基質(zhì)金屬蛋白酶9（MMP-9）的目的基因mRNA轉(zhuǎn)錄水平被瘦素（Leptin）在基因?qū)用孢M(jìn)行調(diào)控，從而影響MMP-9的目的基因的蛋白表達(dá)水平，繼而間接影響胃癌細(xì)胞的浸潤、轉(zhuǎn)移。
　　2瘦素（Leptin）在人胃癌中對基質(zhì)金屬蛋白酶9（MMP-9）起負(fù)調(diào)節(jié)作用，其與MMP-