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文檔簡介
1、中國醫(yī)科大學博士學位論文單核苷酸多態(tài)與胃癌侵襲相關性研究姓名:李愛琳申請學位級別:博士專業(yè):臨床醫(yī)學;腫瘤學指導教師:王振寧201205提取的DNA樣本,并收集匹配的404例健康個體外周血提取的DNA樣本,利用MALDITOFMS進行基因型分析,目的為研究肝素酶基因和NMEl基因單個SNPs位點及其構(gòu)成的單體型與胃癌易感性、臨床病理特征及預后的相關性,以尋找功能性SNPs及單體型作為預測胃癌侵襲能力及預后的分子標記,這對胃癌的防治具有重
2、要的意義。方法1、實驗標本收集病例組標本來源為404例胃癌患者術后石蠟包埋正常胃組織,對照組標本來源為年齡性別與病例組一比一匹配404名健康人外周血。2、基因組DNA提取福爾馬林固定的石蠟包埋組織應用QIAamp@DNAFFPE提取試劑盒(德國)提取DNA,外周血DNA提取應用TaKaRa全基因組DNA提取試劑盒,依說明書描述操作。3、基因分型我們使用MALDITOFMS方法進行基因分型,針對每一個SNP分別設計正向引物、反向引物、延伸
3、探針,按樣品數(shù)的1%加入陰性對照,按樣品數(shù)的1%N入室內(nèi)質(zhì)控標準品對照,按樣品數(shù)的5%隨機選取樣品做為重復實驗復核?;蛐头治龅牟僮魅藛T不知道所檢測標本的病例或?qū)φ諏傩浴?、統(tǒng)計分析統(tǒng)計分析用PASWStatisticslg0(SPSS,Inc,Somers,NY,USA)軟件進行應用了貯檢驗,置換檢驗,非條件性logistic回歸模型,KaplanMeier生存分析,logrank檢驗,單因素和多因素Cox回歸分析。并使用Haplov
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