皮膚組織工程中骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞作為種子細(xì)胞的可行性研究.pdf

1、皮膚移植是治療大面積燒傷或創(chuàng)傷后皮膚缺損的主要手段。其中自體皮移植是臨床最為有效的方法，但受到自體皮源不足的限制。隨著組織工程的興起，人們意識(shí)到開(kāi)發(fā)出能有效促進(jìn)創(chuàng)面愈合與皮膚組織再生的新型皮膚再生產(chǎn)品具有重要意義。組織工程三大要素是種子細(xì)胞，支架材料及合適的微環(huán)境。種子細(xì)胞一直是組織工程研究的關(guān)鍵要素。理想的種子細(xì)胞應(yīng)該具有以下的特點(diǎn)：來(lái)源方便；在體外增殖迅速可以短期擴(kuò)增到所需的數(shù)量；長(zhǎng)期體外傳代不改變生物學(xué)特性等。骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞是成

2、體干細(xì)胞的一種，具有自我更新能力和多向分化潛能。在特定的條件下可以成骨細(xì)胞，成軟骨細(xì)胞及成脂肪細(xì)胞分化。骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的獲取不受倫理學(xué)的限制，且取材方便，免疫排斥反應(yīng)小，增殖能力強(qiáng)，是一種理想的種子細(xì)胞。 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞能否向表皮細(xì)胞分化?能否作為構(gòu)建組織皮膚工程的種子細(xì)胞?我們的試驗(yàn)基于這一思路展開(kāi)。我們之前的研究結(jié)果表明骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞有很大可能分化為表皮細(xì)胞。于是我們從重復(fù)體外誘導(dǎo)分化，到動(dòng)物創(chuàng)面愈合中再上皮化的表皮細(xì)

3、胞中有無(wú)人源的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞，再到體外用不對(duì)稱支架構(gòu)建看骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞能否形成表皮層或協(xié)同表皮細(xì)胞形成表皮。我們進(jìn)行了大量的試驗(yàn)，但總的結(jié)果顯示骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞盡管能促進(jìn)創(chuàng)面的愈合，但分化為表皮細(xì)胞的確有難度。最后我們又從大面積燒傷病人著手，探討在應(yīng)激反應(yīng)中，機(jī)體能否動(dòng)員人的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞到血液中而參與燒傷創(chuàng)面的修復(fù)，及今后血源性間充質(zhì)干細(xì)胞有無(wú)可能作為表皮的種子細(xì)胞?結(jié)果顯示可能性存在，但分離純化的方法上還需努力。本實(shí)驗(yàn)的主要結(jié)

4、果及推論如下： 1．采用Percoll密度梯度離心結(jié)合貼壁篩選分離并培養(yǎng)擴(kuò)增成人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞，所得骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞呈典型的成纖維細(xì)胞形態(tài)，漩渦狀生長(zhǎng)；具有骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的表面標(biāo)志物。 2．人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞在特殊誘導(dǎo)液的作用下具有向表皮細(xì)胞分化的可能性。 3．人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞和體外定向誘導(dǎo)分化后的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞對(duì)裸鼠的皮膚創(chuàng)面都有促進(jìn)愈合作用，但在特殊誘導(dǎo)液作用下的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞并沒(méi)有表現(xiàn)出表皮細(xì)胞的