雌、孕激素對人絨癌細胞系JEG-3侵襲性影響及其機制研究.pdf

1、人早孕滋養(yǎng)層細胞適當侵入子宮內(nèi)膜（植入）是成功妊娠的關鍵，滋養(yǎng)層細胞的侵入過程包含大量復雜的、彼此聯(lián)系的事件，受到嚴格的時空調(diào)控。滋養(yǎng)層細胞侵襲過度或不足均可導致病理性妊娠如先兆子癇、妊娠高血壓綜合征等疾病的發(fā)生。滋養(yǎng)細胞通過分泌蛋白酶類而獲得侵襲能力，基質(zhì)金屬蛋白酶是其中重要的一種，MMPs活性依賴于鋅、鈣離子，其主要的生理功能是降解細胞外基質(zhì)成分并重塑細胞外基質(zhì)。有研究指出：滋養(yǎng)細胞MMP-2和/或MMP-9表達水平的變化在調(diào)節(jié)滋養(yǎng)

2、細胞侵襲過程中起關鍵作用。雌、孕激素是調(diào)控妊娠早期滋養(yǎng)細胞侵襲性，以使胚胎正常植入并維持妊娠成功的關鍵因素，對其調(diào)節(jié)機制的研究，有助于更好的理解病理性妊娠并為滋養(yǎng)層侵襲性疾病的防治提供新的思路。氧分壓變化是妊娠早期顯著的特征性微環(huán)境，因此，具有細胞“氧感受器”樣效應的缺氧誘導因子（HIF），以及腺苷及其受體信號系統(tǒng)在細胞侵襲行為調(diào)控中的作用倍受關注，然而JEG-3細胞的相關研究尚未見報道?；诖?，本研究利用絨癌細胞腫瘤細胞系JEG-3細

3、胞作為滋養(yǎng)細胞模型，觀察分析體外模擬妊娠早期雌、孕激素環(huán)境條件下JEG-3細胞侵襲相關酶類的表達變化，以及腺苷受體信號通路在其侵襲性調(diào)節(jié)中的作用。 1．目的: 體外模擬妊娠早期母胎界面微環(huán)境，檢測雌、孕激素對絨癌細胞系JEG-3細胞形態(tài)、侵襲功能的影響及其機制，揭示母胎界面微環(huán)境中滋養(yǎng)層細胞侵襲行為的的分子基礎，為滋養(yǎng)層細胞疾病與雌激素、孕激素的關系提供進一步的理論依據(jù)，從而有利于滋養(yǎng)層細胞疾病發(fā)病與治療的認識。

4、 2．方法: 2．1 JEG-3絨癌細胞的培養(yǎng)與收集； 2．2 倒置顯微鏡觀測JEG-3絨癌細胞形態(tài)； 2．3 RT-PCR．檢測JEG-3絨癌細胞腺苷受體的表達； 2．4 Real time-PCR定量檢測JEG-3絨癌細胞腺苷受體A2bR表達； 2．5明膠酶譜檢測JEG-3細胞金屬基質(zhì)蛋白酶MMP-2、MMP-9的分泌 3．結(jié)果: 3．1 雌、孕激素對JEG-3細胞形態(tài)無顯著性

5、影響（P<0．05） 3．2 JEG-3絨癌細胞表達MMP-2及MMP-9，雌、孕激素顯著上調(diào)JEG-3細胞MMP-2表達（P<0．05） 3．3 JEG-3絨癌細胞表達三種腺苷受體A1R，A2aR，A2bR，雌激素和/或孕激素條件下表達上調(diào)的基因是A2bR（P<0．05），A1R、A2aR的表達沒有顯著變化。 3．4 雌、孕激素影響JEG-3細胞A2bR mRNA表達，顯著升高兩倍（P<0．05） 3．

6、5 特異性阻斷A2bR通路JEG-3細胞分泌MMP-2顯著減少（P<0．05） 4. 結(jié)論: 4．1 雌激素、孕激素及雌孕激素聯(lián)合處理對JEG-3滋養(yǎng)細胞系形態(tài)均無顯著性影響。 4．2 JEG-3細胞表達MMP-2及MMP-9，但MMP-9的表達顯著弱于MMP-2，提示MMP-2可能是JEG-3細胞侵襲細胞外基質(zhì)的主要酶類。 4．3 絨癌細胞系JEG-3表達三種腺苷受體，雌激素和孕激素顯著上調(diào)腺苷受體A2