2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、目的:通過基因沉默方法研究缺氧誘導因子-1α(HIF-1α)特異性小干擾RNA(siRNA)重組質粒pSUPER<'siHIF-1α>對小鼠視網(wǎng)膜HIF-1α表達及視網(wǎng)膜新生血管的抑制作用。 方法:(1)構建HIF-1α特異性siRNA重組質粒pSUPER<'siHIF-1α>。(2)選擇7d齡C57BL/6J小鼠48只,其中12只為正常組(A組);另36只按照Smith<'[1]>的方法建立氧誘導的視網(wǎng)膜新生血管模型,并隨機分

2、為:對照組(B組)、空載體組(C組)和基因治療組(D組),每組12只。于出艙前1d,向空載體組小鼠玻璃體腔注射pSUPER空載體質粒;基因治療組注射重組質粒pSUPER<'siHIF-lα>。(3)采用FITC-Dextran熒光造影視網(wǎng)膜鋪片觀察4組小鼠視網(wǎng)膜血管形態(tài)變化。(4)RT-PCR檢測各組視網(wǎng)膜組織中HIF-1αmRNA的表達水平。(5)SP免疫組織化學檢測各組間HIF-1α蛋白質的表達差異。 結果: (1)熒光造影

3、視網(wǎng)膜鋪片顯示,A組整個視網(wǎng)膜血管分布呈均勻網(wǎng)狀;B、C組視網(wǎng)膜中周部可見大片無灌注區(qū),見新生血管叢,伴熒光滲漏;D組無灌注區(qū)及新生血管叢較B、C組明顯減少,視網(wǎng)膜血管網(wǎng)狀結構基本正常。(2)RT-PCR結果顯示,B、C組視網(wǎng)膜HIF-1αmRNA表達較A組明顯上調(diào),而D組視網(wǎng)膜組織中HIF-1αmRNA表達較B組下調(diào),抑制效率為57.1%,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01)。(3)免疫組織化學染色顯示,HIF-1α陽性表達定位于細胞核,

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