人腦膠質(zhì)瘤HIF-1α和VEGF表達(dá)研究.pdf

1、膠質(zhì)瘤是最常見的顱內(nèi)原發(fā)性腫瘤。雖然腦腫瘤的手術(shù)技巧以及放療和化療等綜合治療已經(jīng)取得了很大的進(jìn)展，但惡性膠質(zhì)瘤患者的預(yù)后仍然很差。隨著腫瘤生物學(xué)和分子遺傳學(xué)的發(fā)展，人們認(rèn)識(shí)到膠質(zhì)瘤和人類其他腫瘤一樣，在其發(fā)生和進(jìn)展中會(huì)發(fā)生一系列的基因改變。目前，腫瘤內(nèi)的新生血管生成正在逐漸成為生物醫(yī)學(xué)研究的前沿?zé)狳c(diǎn)，并有望成為惡性膠質(zhì)瘤治療的新靶點(diǎn)。隨著腫瘤細(xì)胞的失控性增殖生長(zhǎng)，缺氧環(huán)境在人類實(shí)體腫瘤中非常常見。為克服缺氧對(duì)腫瘤生長(zhǎng)的影響，腫瘤內(nèi)新生血

2、管形成成為腫瘤繼續(xù)生長(zhǎng)和進(jìn)展的必要條件。已經(jīng)證實(shí)如果不存在新生血管的形成，腫瘤的生長(zhǎng)將不會(huì)超過1～2mm3。惡性膠質(zhì)瘤是人類惡性度最高的腫瘤之一，新生血管形成是惡性膠質(zhì)瘤顯著的病理學(xué)特點(diǎn)之一。研究表明缺氧誘導(dǎo)因子-1(Hypoxiainduciblefactor-1，HIF-1)和血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子(VEGF)在腫瘤的新生血管生長(zhǎng)過程中起到非常重要的作用，我們此次研究的目的是檢測(cè)這兩者在人膠質(zhì)瘤中的表達(dá)情況，及其與膠質(zhì)瘤病理級(jí)別之間的

3、關(guān)系。 自2004年9月～2005年5月，我們連續(xù)收集天津醫(yī)科大學(xué)總醫(yī)院和天津市環(huán)湖醫(yī)院手術(shù)切除的新鮮膠質(zhì)瘤標(biāo)本37例和4例正常腦組織標(biāo)本。在實(shí)驗(yàn)的第一部分，我們采用RT-PCR和免疫組化方法對(duì)這41例標(biāo)本檢測(cè)HIF-1αmRNA及其蛋白的表達(dá)情況。在第二部分，我們采用同樣的方法檢測(cè)VEGFmRNA及其蛋白在相同組織標(biāo)本中的表達(dá)。并進(jìn)一步采用統(tǒng)計(jì)學(xué)方法，分析HIF-1α表達(dá)和VEGF表達(dá)之間的相關(guān)性。 實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：不同

4、病理級(jí)別膠質(zhì)瘤中HIF-1α和VEGF的表達(dá)不同，并隨腫瘤級(jí)別的升高，其表達(dá)也明顯升高。應(yīng)用RT-PCR方法，我們?cè)谡ＤX組織里檢測(cè)到HIF-1αmRNA的表達(dá)，而使用免疫組化方法在正常腦組織內(nèi)卻沒有檢測(cè)到其蛋白的表達(dá)。VEGFmRNA和蛋白表達(dá)在正常腦組織中均沒有檢測(cè)到。HIF-1α和VEGF的表達(dá)水平在高級(jí)別的膠質(zhì)瘤內(nèi)高于低級(jí)別的膠質(zhì)瘤。 HIF-1αmRNA相對(duì)于內(nèi)參β-actinmRNA的表達(dá)在正常腦組織、Ⅰ～Ⅱ級(jí)膠質(zhì)瘤

5、、Ⅲ級(jí)膠質(zhì)瘤和Ⅳ級(jí)膠質(zhì)瘤中分別為0.25±0.07、0.32±0.15、0.72±0.13和0.95±0.17。HIF-1α蛋白表達(dá)陽性率在Ⅰ～Ⅱ級(jí)膠質(zhì)瘤、Ⅲ級(jí)膠質(zhì)瘤和Ⅳ級(jí)膠質(zhì)瘤中分別為30.8％，80％和100％。在低級(jí)別和高級(jí)別的膠質(zhì)瘤中，HIF-1α的表達(dá)具有顯著性統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.05)。HIF-1α的mRNA及蛋白表達(dá)和膠質(zhì)瘤的級(jí)別呈正相關(guān)性(mRNAr=0.862，P＜0.05；蛋白r=0.796，P＜0.05)。

6、 VEGFmRNA相對(duì)于內(nèi)參β-actinmRNA的表達(dá)Ⅰ～Ⅱ級(jí)膠質(zhì)瘤、Ⅲ級(jí)膠質(zhì)瘤和Ⅳ級(jí)膠質(zhì)瘤中分別為0.27±0.15、0.62±0.07和0.96±0.21。VEGF蛋白表達(dá)陽性率在Ⅰ～Ⅱ級(jí)膠質(zhì)瘤、Ⅲ級(jí)膠質(zhì)瘤和Ⅳ級(jí)膠質(zhì)瘤中分別為38.5％,80％和100％。在低級(jí)別和高級(jí)別的膠質(zhì)瘤中，VEGF的表達(dá)具有顯著性統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.05)。VEGF的mRNA及蛋白表達(dá)同樣和膠質(zhì)瘤的級(jí)別呈正相關(guān)性(mRNAr=0.735，P＜0.05；蛋

7、白r=0.842，P＜0.05)。 HIF-1α和VEGF在mRNA水平和蛋白水平的表達(dá)之間存在正相關(guān)性(mRNAr=0.738，P＜0.05；蛋白r=0.847，P＜0.05)。隨著HIF-1α表達(dá)的升高，VEGF的表達(dá)同時(shí)升高。 HIF-1α和VEGF通過促血管生成作用在膠質(zhì)瘤的惡性進(jìn)展中可能起到關(guān)鍵作用。他們可能成為膠質(zhì)瘤治療中很有意義的治療目標(biāo)，不過他們?cè)谥委熤械恼鎸?shí)療效還需要通過更多的實(shí)驗(yàn)研究得到證實(shí)，對(duì)此還需