人類生精細(xì)胞凋亡相關(guān)新基因TSARG6與AR關(guān)系的初步研究.pdf

1、在我國(guó)，不育不孕夫婦比例約為11.47﹪，男性不育又占其中的33.15﹪。在男子不育中特發(fā)性無(wú)精、少精癥是數(shù)量較多、病情較重的一種，但病因一直不明確，要從根本上解決問(wèn)題就必須了解精子發(fā)生的分子機(jī)制。精子發(fā)生和睪丸生殖細(xì)胞凋亡是一個(gè)多種調(diào)控因素參與的有序而復(fù)雜的過(guò)程，迄今為止，人們對(duì)精子發(fā)生的分子機(jī)制了解有限，因而研究特異性的睪丸生殖細(xì)胞凋亡基因的功能在理論上和實(shí)踐上仍然十分重要。 本實(shí)驗(yàn)室劉剛從人類睪丸cDNA文庫(kù)中分離出人類生

2、殖細(xì)胞凋亡新基因TSARG6和小鼠同源新基因mTSARG3。TSARG6蛋白含有DnaJ區(qū)和DnaJ-c區(qū)，屬于熱休克蛋白40家族新成員，在人類睪丸組織中特異表達(dá)。Hsp40在加強(qiáng)Hsp70與HOP復(fù)合體的結(jié)合方面起著關(guān)鍵作用。mTSARG3蛋白分別與Hsp90，Hsp70和AR蛋白存在結(jié)合關(guān)系。 [目的]作為Ⅱ型Hsp40家族新成員的TSARG6在睪丸組織特異性表達(dá)，與精子發(fā)生和雄激素受體表達(dá)密切相關(guān)，但該基因的具體功能并不清

3、楚。本研究將通過(guò)基因突變檢測(cè)實(shí)驗(yàn)以及通過(guò)生物信息學(xué)預(yù)測(cè)來(lái)進(jìn)一步證明TSARG6基因在精子發(fā)生中的具體途徑。 [方法]利用DHPLC結(jié)合限制性內(nèi)切酶酶切和直接測(cè)序法。 [結(jié)果]在TSARG6基因的第2外顯子片斷中發(fā)現(xiàn)5個(gè)多態(tài)位點(diǎn)(其中3個(gè)為已知多態(tài)位點(diǎn)rs10793069，rsl0793068和rs625098，2個(gè)為新發(fā)現(xiàn)的多態(tài)位點(diǎn))，1個(gè)同義突變，1個(gè)錯(cuò)義突變S36P。在TSARG6基因的第8外顯子片斷中，發(fā)現(xiàn)3個(gè)SN