GNAS基因表達與豬成纖維細胞增殖與凋亡關系的初步研究.pdf

1、G蛋白是細胞內(nèi)一類重要的信號轉(zhuǎn)導蛋白，可介導多種信號通路的轉(zhuǎn)導，發(fā)揮重要的生物學功能。GNAS是G蛋白的一個重要的功能亞基，在細胞中可以結(jié)合并激活腺苷酸環(huán)化酶，催化ATP轉(zhuǎn)化為cAMP，而cAMP對調(diào)節(jié)細胞的生長與分裂有著重要的作用。
　　 本研究通過熒光定量PCR研究金華豬GNAS基因不同生長階段（胚胎期60d、80d、105d和出生后1d、25d、60d、90d、120d、150d、180d）眼肌組織中的表達譜;然后設計并合

2、成siRNA序列，對GNAS基因進行干擾表達，檢測GNAS基因?qū)鹑A豬成纖維細胞中增殖與凋亡基因bcl-2、fas和caspase-3表達的影響;最后通過生物信息學技術對GNAS基因進行染色體電子定位，查詢該基因位置上的QTL分布。并對金皮資源家系F1代個體GNAS基因進行PCR擴增并測序，尋找豬GNAS基因位點上的突變位點，以分析該基因的生物學特性。
　　 結(jié)果表明，胚胎期從眼肌組織分化出到胚胎期80d，GNAS基因mRNA表

3、達逐漸升高，胚胎期80d到出生表達逐步降低，出生后1d到成年90d之間逐步升高，在120d時突然降低，之后又開始上升，到150d時表達達到最高，之后又下降，與豬的生長規(guī)律相類似。GNAS基因mRNA水平表達在不同日齡間差異極顯著(P＜0.01);RNAi技術干擾細胞中GNAS基因的表達發(fā)現(xiàn)，GNAS基因mRNA水平表達下調(diào)77％，同時fas、bcl-2和caspase-3三個增殖凋亡基因表達也分別下調(diào)了18％、46％和21％。應用生物信