高脂血癥對大鼠基因組DNA及bcl-2甲基化的影響.pdf

1、目的：探討高脂血癥(Hyperlipidemia，HL)對wistar大鼠主動(dòng)脈基因組DNA總甲基化水平及總甲基轉(zhuǎn)移酶活力的影響。并進(jìn)一步研究bcl-2基因啟動(dòng)子區(qū)甲基化及mRNA表達(dá)在hyperlipidemia wistar大鼠主動(dòng)脈組織中的作用。方法：將44只健康清潔級成年wistar雄性大鼠隨機(jī)分為2組：對照組和高脂組，每組22只。對照組給予普通大鼠飼料，高脂組給予相應(yīng)的配方飼料。喂養(yǎng)3個(gè)月后心臟取血檢測血清中總膽固醇（tota

2、l cholesterol，TC）、甘油三酯（triglyceride，TG）、低密度脂蛋白膽固醇（low density lipoprotein-cholesterol，LDL-C）和高密度脂蛋白膽固醇（high density lipoprotein-cholesterol，HDL-C)相關(guān)指標(biāo)。留取主動(dòng)脈組織行病理切片，HE染色。提取主動(dòng)脈基因組DNA檢測基因組DNA總甲基化水平;提取主動(dòng)脈核蛋白檢測基因組DNA總甲基轉(zhuǎn)移酶（DN

3、A methyltransferase,DNMT）活力；采用nMSP（Nested methylation specific poly merase chain reaction）法檢測對照組、高脂組大鼠主動(dòng)脈組織bcl-2基因啟動(dòng)子區(qū)甲基化變化；采用實(shí)時(shí)熒光定量RT-PCR法檢測 bcl-2基因在各組大鼠主動(dòng)脈組織中mRNA的表達(dá)變化。用單因素方差分析及卡方檢驗(yàn)對統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析。結(jié)果：1、高脂組大鼠血清 TC、TG、 LDL-C水平

4、明顯高于對照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）， HDL-C與對照組比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。HE染色法結(jié)果顯示：高脂組大鼠主動(dòng)脈血管外膜增厚，見少許炎細(xì)胞浸潤，滋養(yǎng)血管增生，血管中膜增厚，內(nèi)彈性膜及中膜的彈性膜極度彎曲，內(nèi)膜完整，內(nèi)皮細(xì)胞變形突向管腔等早期動(dòng)脈粥樣硬化改變。2、高脂血癥可增加大鼠主動(dòng)脈基因組DNA總甲基轉(zhuǎn)移酶活力，促使基因組DNA去甲基化，與對照組相比，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。3、高脂血癥可使大

5、鼠主動(dòng)脈 bcl-2基因啟動(dòng)子區(qū)甲基化水平增高，與對照組相比，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01），并降低bcl-2基因mRNA表達(dá)，與對照組相比，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。結(jié)論：1、高脂飼料喂養(yǎng)wistar大鼠3月，根據(jù) TC、TG、LDL-C、HDL-C血脂指標(biāo)可成功建立高脂血癥大鼠模型，且動(dòng)物模型主動(dòng)脈病理圖片有 AS早期病理改變。說明模型穩(wěn)定，可復(fù)制性強(qiáng)，能作為研究高脂血癥及AS的良好模型。2、高脂血癥可降低基因組DNA總甲基化水平