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文檔簡介
1、目的:探索使用氯化錳標記前列腺癌細胞株(PC-3)行體外磁共振成像(MRI)的可行性和安全性。
方法:將購買的PC-3進行復蘇、培養(yǎng)和擴增。在37℃、5%CO2培養(yǎng)箱中,PC-3與8組含不同氯化錳濃度(0.1mM、0.3mM、0.5mM、1.0mM、2.0mM、3.0mM和5.0mM)的F-12 HAM'S培養(yǎng)基共同培養(yǎng),1小時后收集,于3.0T磁共振成像儀行磁共振成像。另外,對不同細胞數(shù)量級(1.0×105個、5.0×1
2、05個、1.0×106個和2.0×106個)的標記PC-3和不同時間段(4小時、24小時和3天)的標記PC-3行磁共振成像。鈣離子通道阻滯劑(維拉帕米)干預不同時間段(24小時和3天)的標記PC-3,磁共振成像觀察其信號強度變化。不同氯化錳濃度標記的PC-3及標記后不同時間段的PC-3分別與CCK-8活細胞計數(shù)試劑盒反應后,酶聯(lián)免疫檢測儀測定其吸光度值(OD)。電子顯微鏡觀察標記PC-3的變化。
結(jié)果:氯化錳標記的PC-3
3、以縮短縱向弛豫時間T1為主,在T1WI-MRI上顯示為高信號,不同氯化錳濃度標記的PC-3的信號強度與未標記的PC-3的信號強度具有統(tǒng)計學顯著性差異(P<0.01)。1.0mM氯化錳標記的PC-3在細胞數(shù)量為5.0×105個時即可顯示出高信號強度。在體外培養(yǎng)的條件下,標記后24小時的PC-3的信號強度明顯下降,標記后3天基本恢復至未標記的PC-3的信號強度。鈣離子通道阻滯劑(維拉帕米)可影響錳離子在細胞內(nèi)外的分布并可適當延長氯化錳標記的
4、PC-3的成像時間。標記后4小時,除0.1mM氯化錳對PC-3活性沒有影響(P>0.05)外,其余各濃度組(>0.1mM)的氯化錳對PC-3均有不同程度的毒性影響(P<0.05);標記后24小時至14天,能形成峰值高信號強度的標記濃度(0.5~1.0mM)的氯化錳對細胞的活性影響不明顯(P>0.05)。電子顯微鏡可以觀察到錳離子沉積于個別線粒體內(nèi),致線粒體腫脹以及部分外膜和嵴消失。
結(jié)論:氯化錳可以有效標記PC-3,并能在
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