整腸生對(duì)肝纖維化大鼠腸粘膜屏障保護(hù)作用的研究.pdf

1、研究背景：
　　 臨床上肝硬化患者常伴隨腸源性內(nèi)毒素血癥(intestinalendotoxemia，IETM)，而腸粘膜屏障損傷是形成IETM的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。導(dǎo)師劉立新前期研究發(fā)現(xiàn)硫代乙酰胺（thioacetamide，TAA）在誘導(dǎo)大鼠肝纖維化的同時(shí)伴有IETM，故本研究采用TAA制備大鼠肝纖維化模型。益生菌制劑培菲康是雙歧桿菌、乳酸桿菌和糞鏈球菌的三聯(lián)活菌制劑，目前在臨床上廣泛用于治療因腸道菌群失調(diào)引起的急慢性腹瀉，并對(duì)肝硬化

2、患者有輔助治療作用，本研究將培菲康作為陽(yáng)性對(duì)照藥物。
　　 整腸生，又名地衣芽孢桿菌，是我國(guó)首次研制成的新型益生菌制劑，目前在臨床上常用于因腸道菌群失調(diào)引起的腸功能紊亂，如急慢性腹瀉、脹氣、消化不良等。而整腸生對(duì)肝纖維化大鼠腸粘膜屏障是否具有保護(hù)作用，目前未見報(bào)道，故此設(shè)計(jì)了本課題。
　　 目的：
　　 明確整腸生對(duì)肝纖維化大鼠腸粘膜屏障是否具有保護(hù)作用，以及對(duì)腸源性內(nèi)毒素血癥和肝纖維化的影響。
　　 方

3、法：
　　 將40只正常雄性SD大鼠隨機(jī)分為5組，每組8只：
　　 (1)正常對(duì)照組(A)：自由喂養(yǎng)，不做任何處理；
　　 (2)模型組(B)：TAA皮下注射，100mg/kg,3次/周，連續(xù)9周；
　　 (3)培菲康組(C)：TAA用法同模型組，連續(xù)9周；皮下注射TAA2周后開始給予培菲康灌胃，2ml/只,35mg/ml，1次/日，連續(xù)7周；
　　 (4)整腸生低劑量組(D)：TAA用法同模型組

4、，連續(xù)9周，皮下注射TAA2周后開始給予整腸生灌胃,5mg/kg，1次/日，連續(xù)7周；
　　 (5)整腸生高劑量組(E)：TAA用法同模型組，連續(xù)9周，皮下注射TAA2周后開始給予整腸生灌胃，15mg/kg，1次/日，連續(xù)7周。
　　 40只大鼠均于9周末乙醚麻醉，無菌無熱源腹主動(dòng)脈取血，檢測(cè)血漿中內(nèi)毒素水平及血清中丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(alanineaminotransferase，ALT)、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(aspa

5、rtateaminotransferase，AST)、乳酸脫氫酶(lactatedehydrogenase，LDH)、丙二醛(malondialdehyde，MDA)及二胺氧化酶（diamineoxidase，DAO）水平；將肝左葉用10％中性甲醛固定用于HE染色；分離回腸末端組織15cm，用10％中性甲醛固定用于HE染色及甲苯胺藍(lán)染色。
　　 結(jié)果：
　　 1.血液各指標(biāo)結(jié)果：與正常對(duì)照組相比，模型組血漿中內(nèi)毒素、血清

6、中ALT、AST、LDH、MDA和DAO的水平均升高(P值均＜0.01)；與模型組相比，培菲康組血清中ALT水平降低(P＜0.01)，培菲康組、整腸生低和高劑量組血漿中內(nèi)毒素、血清中AST、LDH、MDA和DAO水平均降低(P值均＜0.01)；與正常對(duì)照組相比，整腸生高劑量組血漿中內(nèi)毒素及血清中ALT水平均升高(P值均＜0.01)。
　　 2．HE染色和甲苯胺藍(lán)染色結(jié)果：與模型組相比，培菲康組、整腸生低劑量組和整腸生高劑量組肝臟