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文檔簡介
1、目的:觀察肝門阻斷后腸粘膜屏障功能的變化,初步探討腸粘膜屏障的損傷機(jī)制,研究亞低溫治療對肝門阻斷后大鼠腸粘膜屏障的保護(hù)作用,為亞低溫治療的臨床應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。
方法:本實(shí)驗(yàn)選用雄性SD大鼠30只,按隨機(jī)原則分為三組,每組10只:①對照組(C):常溫下行開關(guān)腹術(shù);②常溫阻斷組(Pringle-N):常溫下間斷阻斷肝門,建立大鼠腸瘀血模型;③亞低溫阻斷組(Pringle-M):間斷阻斷肝門,建立大鼠腸瘀血模型,給予亞低溫干預(yù)
2、,分別于術(shù)后1、4、7天分別取外周血,ELISA法檢測血漿內(nèi)毒素、二胺氧化酶、D乳酸濃度;各組大鼠于術(shù)后7天斷頸處死,分別切取末端回腸及結(jié)腸各3cm(距回盲部3cm),行HE及免疫組織化學(xué)染色,檢測Occludin和sIgA表達(dá)水平。
結(jié)果:
1.體重變化:各組大鼠術(shù)后體重均較術(shù)前減輕(P<0.05),亞低溫阻斷組較對照組減輕明顯(12.00±3.87vs7.60±5.36,P<0.05);常溫阻斷組較亞低溫
3、阻斷組減輕明顯(18.20±7.64vs12.00±3.87,P<0.05)。
2.腸粘膜病理改變:各組大鼠小腸粘膜厚度、絨毛高度、隱窩深度比較,肝門阻斷組較對照組均有不同程度下降,存在顯著性差異,但亞低溫阻斷組較常溫組下降減輕,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
3.腸粘膜病理損傷評分:各組間存在顯著性差異,常溫阻斷組病理損傷評分顯著高于對照組(30.70±4.45vs14.70±3.16,P<0.01);亞低溫阻斷組病理
4、損傷評分高于對照組,但顯著低于常溫組(25.60±4.33vs30.70±4.45,P<0.05),亞低溫阻斷組較常溫組損傷減輕。
4.免疫組化染色:Occludin免疫組化染色以上皮細(xì)胞胞膜及胞質(zhì)棕黃色顆粒為陽性細(xì)胞,各組均可見有陽性表現(xiàn),組間陽性細(xì)胞百分率存在顯著性差異,亞低溫阻斷組及常溫組均較對照組降低,但常溫組較亞低溫組降低更明顯(P<0.05);sIgA免疫組化染色以上皮細(xì)胞及漿細(xì)胞棕黃色顆粒為陽性細(xì)胞,各組均可
5、見有陽性表現(xiàn),組間陽性細(xì)胞百分率存在顯著性差異,亞低溫阻斷組及常溫組均較對照組降低,但常溫組較亞低溫組降低更明顯(P<0.05)。
5.術(shù)后各組血漿內(nèi)毒素、DAO、D乳酸均較術(shù)前明顯增高,第1、4、7天逐漸降低,亞低溫組較常溫組恢復(fù)更快,但仍高于術(shù)前水平,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
結(jié)論:
1.成功建立大鼠腸粘膜瘀血模型,大鼠術(shù)后體重下降,小腸形態(tài)學(xué)改變表現(xiàn)為絨毛壞死,隱窩消失,腸屏障功能改變表現(xiàn)為機(jī)械
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