枯草芽孢桿菌發(fā)酵條件優(yōu)化及在刺參養(yǎng)殖中的應(yīng)用研究.pdf

1、刺參（Apostichopus japonicus）具有極高的營養(yǎng)和藥用價值，被譽為“海產(chǎn)八珍”之首，是我國北方最具有經(jīng)濟價值的水產(chǎn)養(yǎng)殖品種之一。近年來，工廠化養(yǎng)殖發(fā)展迅速，但病害問題日趨嚴重，極大地影響了刺參養(yǎng)殖的經(jīng)濟效益。在刺參養(yǎng)殖中使用抗生素的現(xiàn)象屢見不鮮，抗生素在一定程度上能夠抑制刺參病害的發(fā)生，但大量使用帶來的負面效應(yīng)也是不容忽視的。近年來，在飼料或養(yǎng)殖水體中添加益生菌代替抗生素已成為健康養(yǎng)殖新的研究方向?？莶菅挎邨U菌（Bac

2、illus subtilis）是一種在水產(chǎn)養(yǎng)殖中應(yīng)用比較廣泛的益生菌，其益生作用包括：凈化水質(zhì)，分泌外源性消化酶促進機體對營養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收，提高機體非特異性免疫酶活性，以及改善動物腸道微生態(tài)環(huán)境等。本文對枯草芽孢桿菌 YSFRI-403的培養(yǎng)基配方及發(fā)酵條件進行了優(yōu)化并對其在刺參養(yǎng)殖中的應(yīng)用效果進行了研究。
　　一、枯草芽孢桿菌YSFRI-403培養(yǎng)基配方及發(fā)酵條件的優(yōu)化
　　通過搖瓶單因子試驗和多因素正交試驗對枯草芽孢桿

3、菌YSFRI403進行發(fā)酵優(yōu)化，確定了最佳的發(fā)酵培養(yǎng)基的配方：玉米粉10 g/L，馬鈴薯淀粉10 g/L，豆粕粉15 g/L，Na2HPO43 g/L，NaH2PO43 g/L，30.8 mg/kg MnSO40.5 g/L。最佳發(fā)酵條件：培養(yǎng)溫度為37℃、pH值7.5、轉(zhuǎn)速為140 rpm，接種量7％，裝液量20%。經(jīng)優(yōu)化后活菌數(shù)顯著提高，達到2.72×1011 CFU/ml。
　　本研究中所用的發(fā)酵原料價格便宜易得，經(jīng)濟效益好

4、，活菌數(shù)高，在工業(yè)發(fā)酵中應(yīng)用性強。
　　二、枯草芽孢桿菌對刺參生長的益生作用及對養(yǎng)殖水質(zhì)的影響
　　為研究枯草芽孢桿菌（Bacillus subtilis）在刺參養(yǎng)殖中的益生作用，運用生化方法分析了不同濃度枯草芽孢桿菌制劑對養(yǎng)殖水質(zhì)、刺參的生長、消化酶活性、非特異性免疫酶活性以及腸道就群的影響。實驗結(jié)果表明，與對照組相比，添加枯草芽孢桿菌制劑，能夠顯著降低養(yǎng)殖水體中的硝酸鹽和亞硝酸鹽，去除率最高可達42.28%和22.33%

5、，對水體中氨氮和化學(xué)需氧量含量影響不顯著；試驗組刺參特定生長率顯著提高，枯草芽孢桿菌添加量為6ppm時，SGR提高40.74%；添加量為6ppm時淀粉酶提高30.27%，添加量為5ppm時，蛋白酶活性提高53.93%，達到顯著水平差異，但脂肪酶活性無顯著提高；非特異性免疫酶（過氧化物酶、堿性磷酸酶、溶菌酶、超氧化物歧化酶）活性均顯著高于對照組，枯草芽孢桿菌添加6ppm效果最好，分別提高135%、27%、396%、192%；養(yǎng)殖水體中添加