臍血干細(xì)胞與骨髓干細(xì)胞聯(lián)合移植治療肝衰竭的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、背景及目的：
　　 我國急性肝功能衰竭發(fā)生率高，其病理特點(diǎn)是大塊或亞大塊肝細(xì)胞壞死，而殘存肝細(xì)胞的增殖受到各種因素的抑制難以再生。原位肝移植是治療終末期肝病的有效方法，但因供肝不足，價(jià)格昂貴，而且需要終身服用免疫抑制劑等諸多因素限制了其臨床應(yīng)用。
　　 干細(xì)胞移植作為輔助治療方法是肝移植的重要補(bǔ)充。目前已經(jīng)有大量實(shí)驗(yàn)研究證實(shí)干細(xì)胞在一定的條件下能夠向肝細(xì)胞定向分化。本文主要觀察臍血干細(xì)胞和自體骨髓干細(xì)胞共同移植治療D-g

2、al所致大鼠急性肝衰竭療效，為臨床干細(xì)胞共移植治療肝衰竭提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　 方法：
　　 1.采集，培養(yǎng)干細(xì)胞：采集大鼠臍血和骨髓后，在培養(yǎng)體系中加入特定的細(xì)胞因子：促肝細(xì)胞生長因子(hepatocyte growth factor，HGF)，干細(xì)胞因子(Stem cell factor，SCF)，觀察細(xì)胞生長情況，培養(yǎng)21天后對細(xì)胞進(jìn)行檢測，采用免疫細(xì)胞化學(xué)檢測培養(yǎng)后的細(xì)胞是否表達(dá)肝細(xì)胞特征產(chǎn)物白蛋白(ALB)和甲胎

3、蛋白(AFP)。
　　 2.動物實(shí)驗(yàn)：D-gal1.4g/kg腹腔注射建立大鼠急性肝衰竭模型。將建模后24小時(shí)存活的大鼠隨機(jī)分成4組。每日（總共7天）分別經(jīng)鼠尾靜脈注入單獨(dú)的臍血干細(xì)胞或骨髓干細(xì)胞以及混合后的臍血干細(xì)胞及骨髓干細(xì)胞或生理鹽水0.8ml。觀察4組大鼠存活率，肝功能及肝組織病理變化程度。
　　 結(jié)果：
　　 1.在SCF，HGF的誘導(dǎo)下，臍血干細(xì)胞和骨髓干細(xì)胞可以在體外擴(kuò)增并分化為肝細(xì)胞。
　　

4、 2.1.4g/kgD-gal所致肝衰竭鼠3天病死率達(dá)80％，組織學(xué)見大面積肝壞死，血清轉(zhuǎn)氨酶，膽紅素明顯升高。而干細(xì)胞治療組72小時(shí)存活率明顯升高，肝組織病變明顯減輕，血清轉(zhuǎn)氨酶，膽紅素明顯降低。
　　 3.臍血干細(xì)胞和骨髓干細(xì)胞共同移植治療組存活率(77％)高于臍血干細(xì)胞治療組(57％)和骨髓干細(xì)胞治療組(50％)，統(tǒng)計(jì)學(xué)比較，肝功能及組織學(xué)改善也優(yōu)于臍血干細(xì)胞治療組和骨髓干細(xì)胞治療組。
　　 結(jié)論：