不同豬種脂肪細(xì)胞分化因子的差異表達(dá)研究.pdf

1、本項(xiàng)目以江口蘿卜豬為試驗(yàn)材料構(gòu)建DNA池，采用測序技術(shù)篩查PPARγ、C/EBPα、ADD1基因多態(tài)性，并作相關(guān)生物信息學(xué)分析；以3、4、5、6、7月齡的江口蘿卜豬、從江香豬和大白豬為試驗(yàn)材料，提取心、肝、脾、肺、腎、小腸、背最長肌和皮下脂肪的總RNA，應(yīng)用實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)檢測PPARγ、C/EBPα、ADD1基因在3個(gè)品種不同月齡各組織中mRNA的相對表達(dá)量，并結(jié)合屠宰試驗(yàn)進(jìn)行 PPARγ、C/EBPα、ADD1基因表達(dá)水平與其

2、肉質(zhì)性能的相關(guān)性分析。獲得主要結(jié)果如下：
　　1.本研究對江口蘿卜豬PPARγ、C/EBPα、ADD1基因進(jìn)行多態(tài)位點(diǎn)檢測。PPARγ基因共篩查出8個(gè)多態(tài)位點(diǎn)，其中位于外顯子上有3個(gè)，其余5個(gè)均位于內(nèi)含子上；ADD1基因共篩查出3個(gè)多態(tài)位點(diǎn)，其中位于外顯子上有1個(gè)，2個(gè)位于內(nèi)含子上；C/EBPα基因未檢測出多態(tài)位點(diǎn)。位于PPARγ基因3個(gè)外顯子中， exon2-C50T、exon7-G53T、exon9-C32T均為錯(cuò)義突變，對應(yīng)

3、的氨基酸由蘇氨酸（ Thr）改變?yōu)楫惲涟彼幔↖le）、天冬氨酸（Asp）改變?yōu)槔野彼幔═yr）、丙氨酸（Ala）改變?yōu)樘於彼幔ˋsp）；位于ADD1基因外顯子上的exon8-G87A位點(diǎn)為同義突變，其突變未引起氨基酸的改變。對引起錯(cuò)義突變的多態(tài)位點(diǎn)進(jìn)行生物信息學(xué)分析表明突變前后mRNA二級結(jié)構(gòu)、蛋白質(zhì)二級、三級結(jié)構(gòu)均有差異。
　　2. PPARγ、C/EBPα、ADD1在大白豬3、4、5、6、7月齡各組織中均有表達(dá)，在肝、小腸、

4、背最長肌、皮下脂肪的表達(dá)水平較高，心、脾、肺、腎的表達(dá)水平較低。其中PPARγ在小腸、背最長肌、皮下脂肪中3、4月齡分別與6、7月齡的表達(dá)量差異極顯著（P<0.01）。C/EBPα、ADD1在肝、肺、小腸、皮下脂肪中3月齡與6、7月齡差異極顯著（P<0.01）；PPARγ、C/EBPα、ADD1在江口蘿卜豬心、脾、肺、腎、背最長肌的表達(dá)量最低，在皮下脂肪中最高，具有組織特異性。其表達(dá)量隨月齡遞增而上升，皮下脂肪的增加幅度最大。其中PPA

5、Rγ、ADD1在小腸、背最長肌、皮下脂肪中3、4月齡與6、7月齡的表達(dá)量差異極顯著（P<0.01）。C/EBPα在小腸、皮下脂肪中3月齡與5、6、7月齡的表達(dá)量均差異極顯著（P<0.01）；PPARγ、C/EBPα、ADD1在從江香豬心、肝、脾、肺、腎、小腸、背最長肌的表達(dá)量較低，在皮下脂肪的表達(dá)量最高，PPARγ的表達(dá)量隨月齡增加而上升的幅度較小，C/EBPα、ADD1在各組織中的表達(dá)量隨時(shí)間增加而上升。其在小腸、皮下脂肪、背最長肌中

6、3、4月齡與6、7月齡的表達(dá)量差異極顯著（P<0.01）?？傮w上PPARγ、C/EBPα、ADD1基因在各組織均有表達(dá)，組織間的表達(dá)量存在差異，皮下脂肪的表達(dá)量最高，其次肝、肺、小腸、背最長肌中較高，心、脾、腎中的表達(dá)量最低，其中在肝、小腸、皮下脂肪中為高豐度表達(dá)。隨著月齡的增加，PPARγ、C/EBPα、ADD1基因mRNA的表達(dá)模式基本相同，總體呈現(xiàn)上升趨勢，6、7月齡的表達(dá)水平較高，即隨著月齡的增加而逐漸上升，到生長后期維持一個(gè)相

7、對穩(wěn)定水平。不同品種間 PPARγ、C/EBPα、ADD1在相同月齡各組織中的表達(dá)量存在差異，總體上大白豬肝、小腸、皮下脂肪中PPARγ、C/EBPα、ADD1 mRNA的表達(dá)量分別與江口蘿卜豬、從江香豬差異顯著（P<0.05）。綜合而言，PPARγ、C/EBPα、ADD1基因在脂肪型江口蘿卜豬、從江香豬的表達(dá)量高于瘦肉型大白豬。
　　3.從江香豬、江口蘿卜豬、大白豬肌肉的大理石紋、pH值、剪切力、肌內(nèi)脂肪含量、粗蛋白含量隨著月齡

8、的增加而升高，失水率、滴水損失、水份含量、蒸煮損失隨著月齡的增加而下降。從江香豬、江口蘿卜豬其肉質(zhì)性能測定均在正常范圍之內(nèi)，大白豬中其大理石紋評分、肉色評分、肌內(nèi)脂肪含量在3、4月齡時(shí)較低，之后隨著月齡增加而上升到正常值。總體上從江香豬、江口蘿卜豬的肌內(nèi)脂肪含量比大白豬高，6、7月齡時(shí)為4％以上。PPARγ、C/EBPα、ADD1基因在從江香豬、江口蘿卜豬、大白豬的表達(dá)量與肉質(zhì)性能均為正相關(guān)。在心、脾、肺、腎的表達(dá)量與肉色、pH值、滴水