泡桐屬植物的系統(tǒng)發(fā)育研究.pdf

1、泡桐（PaulowniaSieb．et Zucc）為玄參科唯一落葉喬木，其自然分布區(qū)和栽培區(qū)覆蓋我國(guó)各個(gè)地區(qū)，是一種重要的優(yōu)質(zhì)速生樹(shù)材經(jīng)濟(jì)林木。由于泡桐多為異花授粉，均可通過(guò)種間雜交并產(chǎn)生可育后代，而且可以通過(guò)無(wú)性繁殖，形成和保留過(guò)渡類(lèi)型，經(jīng)過(guò)漫長(zhǎng)的種間雜交和反復(fù)回交與自然選擇，各個(gè)種的基因與基因組合，滲入雜交，使得泡桐屬在植物學(xué)分類(lèi)上屬于困難屬。傳統(tǒng)意義上的形態(tài)學(xué)利用表型的重點(diǎn)差異結(jié)構(gòu)將泡桐屬歸入玄參科或紫葳科，而隨后發(fā)展的花粉形態(tài)學(xué)

2、在對(duì)花粉形態(tài)的比對(duì)中發(fā)現(xiàn)顯著差異而將泡桐屬歸入玄參科中，但人們對(duì)泡桐屬及其近緣屬之間的進(jìn)化關(guān)系及其種間進(jìn)化關(guān)系尚未進(jìn)行相關(guān)報(bào)道。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)對(duì)葉綠體基因組psbE-petL、trnD-trnT兩條序列及其聯(lián)合序列數(shù)據(jù)集處理，旨在通過(guò)對(duì)泡桐屬植物種內(nèi)及與其相近科屬的系統(tǒng)發(fā)育學(xué)分析，闡明屬內(nèi)進(jìn)化關(guān)系及系統(tǒng)學(xué)地位，為泡桐屬歸科問(wèn)題提供依據(jù)，同時(shí)也為更有效的收集種質(zhì)資源和選育良種提供參考依據(jù)。主要實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下：
　　(1)提取植物基因組DN

3、A并檢測(cè)DNA的濃度與質(zhì)量。通過(guò)對(duì)改良CTAB法和尿素法的比對(duì)和綜合考慮，最終選擇能提取出質(zhì)量較好，適合基因組擴(kuò)增需求的改良的CTAB法。
　　(2)本次研究通過(guò)優(yōu)化PCR反應(yīng)體系，建立適合泡桐屬植物及其近緣科植物的體系，即含12.5μLTap PCR Master Mix、50ng DNA，各0.40mmol·L-1正反引物，補(bǔ)充ddH2O至25μL的體系。通過(guò)改良PCR擴(kuò)增條件，篩選出適量的DNA模板、引物濃度、退火溫度，使擴(kuò)

4、增產(chǎn)物測(cè)序完整。通過(guò)從10對(duì)葉綠體基因組序列中篩選基因比對(duì)差異明顯2對(duì)引物序列：psbE-petL、trnD-trnT，并利用相應(yīng)軟件具體分析序列構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹(shù)。
　　(3)通過(guò)構(gòu)建模型得出泡桐屬及其近緣科的遺傳距離，得出的結(jié)論如下：白花泡桐、毛泡桐和川泡桐之間的遺傳距離較大，蘭考泡桐、楸葉泡桐、南方泡桐和山明泡桐之間的遺傳距離較小，且這些結(jié)果符合形態(tài)學(xué)上的研究。
　　(4)通過(guò)2對(duì)引物序列及序列合并數(shù)據(jù)集構(gòu)建的系統(tǒng)發(fā)育樹(shù)表