若爾蓋草原棘豆屬植物根瘤菌遺傳多樣性及系統(tǒng)發(fā)育研究.pdf

1、氮素是植物生長最重要的營養(yǎng)元素之一，土壤中氮素的來源主要包括施用化學氮肥和土壤微生物的生物固氮作用，根瘤菌與豆科植物的共生固氮作用是生物固氮中效率最高的體系，豆科植物與根瘤菌共生體系具有固氮能力強、固氮量大、抗逆能力強的優(yōu)點，研究根瘤菌與豆科植物的共生固氮作用，有利于實現(xiàn)農業(yè)、環(huán)境和生態(tài)可持續(xù)利用與發(fā)展。 本文采用全細胞蛋白電泳、BOX-AIRPCR、16SrDNAPCR-RFLP、IGSPCR-RFLP、16SrDNA全序列分

2、析等方法對分離自四川若爾蓋草原的26株棘豆根瘤菌，進行了遺傳多樣性和系統(tǒng)發(fā)育的研究。 對26株供試的棘豆根瘤菌和參比菌株的全細胞蛋白電泳結果表明：在71％水平上，供試菌株分為7個遺傳群，主要與中慢生根瘤菌屬參比菌和根瘤菌屬參比菌聚在一起。BOXAIR-PCR分析獲得了較豐富的擴增帶譜，較好地揭示出不同菌株間存在的遺傳差異，供試菌株在71％水平上，分為8個遺傳群，主要也分布為根瘤菌和中慢生根瘤菌2個屬內。 對供試菌株進行的

3、16SrDNAPCR-RFLP、IGSPCR-RFLP分析結果表明：2種方法的分群結果在屬水平上比較一致。16SrDNAPCR-RFLP共有19種遺傳型，在68％相似性水平處，供試根瘤菌被分為2個系統(tǒng)發(fā)育分支，這些菌株在94％相似性水平上進一步分為6個16SrDNAPCR-RFLP遺傳群；IGSPCR-RFLP分析中，由于IGS較16SrRNA基因的保守性低些，其結果表現(xiàn)出了更豐富的遺傳類型。供試菌在65％的相似水平上所有菌株聚在一起，

4、在80％相似水平上供試菌株分為9個IGS遺傳群，供試根瘤菌被分為2個系統(tǒng)發(fā)育分支。 在上述實驗結果基礎上，選取了8株代表菌進行了16SrDNA全序列分析，16SrDNA全序列分析揭示了供試根瘤菌代表菌株的系統(tǒng)發(fā)育地位，供試的棘豆屬植物根瘤菌在系統(tǒng)發(fā)育上分布在根瘤菌(Rhizobium)和中慢生根瘤菌(Mesorhizobium)2分支中。其中，REG320、REG309、REG316、REG305位于Rhizobium分支中，R