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1、目的:咬合對(duì)整個(gè)口頜系統(tǒng)的和諧有著重要的影響。咬合創(chuàng)傷是由于對(duì)頜牙直接或間接所產(chǎn)生的咬合力作為一個(gè)病原因素作用于牙周組織而引起的破壞。此外,其作為一種持續(xù)的損傷性刺激,可以造成多種組織的損害,并伴有疼痛的產(chǎn)生。目前對(duì)于其疼痛產(chǎn)生的分子機(jī)制還不十分清楚。近年來(lái)研究顯示,P2X3受體與致痛關(guān)系密切。鑒于初級(jí)感覺神經(jīng)元P2X3在痛覺過(guò)敏中的作用,結(jié)合咬合創(chuàng)傷后口腔頜面組織出現(xiàn)疼痛的特點(diǎn),我們通過(guò)本項(xiàng)實(shí)驗(yàn)觀察咬合創(chuàng)傷后三叉神經(jīng)節(jié)P2X3的變化,
2、初步分析其在口面部痛信號(hào)發(fā)生、傳導(dǎo)及敏感化中可能的作用。 方法:1.將30只健康并無(wú)牙體、牙周及咬合疾病的大鼠隨機(jī)分成6組,即對(duì)照組、創(chuàng)傷1、3、7、14、21天組,每組5只。用光固化復(fù)合樹脂將直徑0.5mm的鋼絲粘固于實(shí)驗(yàn)組大鼠左上頜第一磨牙頜面,造成對(duì)頜牙的創(chuàng)傷。觀察時(shí)間點(diǎn)內(nèi),每3天檢察鋼絲有無(wú)松動(dòng)、脫落。采用兩種對(duì)照:(1)空白對(duì)照組;(2)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物非創(chuàng)傷側(cè)三叉神經(jīng)節(jié)。 2.到規(guī)定時(shí)間點(diǎn)后,深度麻醉動(dòng)物,經(jīng)左心室插
3、管至升主動(dòng)脈。先用200ml生理鹽水沖凈血液,再用4%多聚甲醛灌注固定,持續(xù)約1.5小時(shí)。灌注完畢立即取實(shí)驗(yàn)側(cè)及對(duì)照側(cè)三叉神經(jīng)節(jié),置上述固定液中固定4-6小時(shí),20%蔗糖溶液4℃至組織塊沉底。恒冷箱切片機(jī)切片,片厚8μm。 3.免疫組織化學(xué)實(shí)驗(yàn)染色4.在10倍顯微鏡下進(jìn)行記數(shù),分析棕黃色細(xì)胞占神經(jīng)元總數(shù)的百分比。5.SPSS11.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理,用成組資料兩樣本均數(shù)比較的t檢驗(yàn)及方差分析進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。 結(jié)果:咬合創(chuàng)
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