表沒(méi)食子兒茶素沒(méi)食子酸酯穩(wěn)定性對(duì)其抗癌細(xì)胞增殖的影響.pdf

1、茶是世界范圍內(nèi)最流行的飲品之一。在它的諸生物學(xué)功能當(dāng)中，抗腫瘤作用受到了最大的關(guān)注。到目前為止，茶中活性成分及其抗腫瘤機(jī)制尚不清楚。表沒(méi)食子兒茶素沒(méi)食子酸酯(epigallocatechin-3-gallate，EGCG)是茶活性成分當(dāng)中含量最多的一種，同時(shí)，在抑制腫瘤及相關(guān)研究中表現(xiàn)的活性也最強(qiáng)。通過(guò)EGCG對(duì)細(xì)胞系作用的研究，獲得了大量關(guān)于茶生物學(xué)活性可能機(jī)制的信息。在許多體外實(shí)驗(yàn)中，指標(biāo)的檢測(cè)通常是在EGCG加入到培養(yǎng)基幾個(gè)小時(shí)甚

2、至幾天以后，因此，很難判斷活性物質(zhì)的主要作用靶點(diǎn)以及明確作用機(jī)制。一些研究表明，EGCG在培養(yǎng)基中會(huì)發(fā)生自氧化作用，其半衰期很短；自氧化過(guò)程中會(huì)產(chǎn)生超氧自由基，而超氧化物歧化酶(SOD)對(duì)其具有很好的清除作用。 在研究中，用MTT方法檢測(cè)EGCG對(duì)人結(jié)腸癌細(xì)胞HT-29、人乳腺癌細(xì)胞系MCF-7、人宮頸癌細(xì)胞Hela三種細(xì)胞生長(zhǎng)的影響；通過(guò)檢測(cè)培養(yǎng)基中乳酸脫氫酶(LDH)的活性，判斷EGCG對(duì)這三種細(xì)胞的毒性作用；用流式細(xì)胞儀檢

3、測(cè)EGCG對(duì)人結(jié)腸癌細(xì)胞HT-29的凋亡誘導(dǎo)情況；通過(guò)培養(yǎng)基中是否含有SOD判斷SOD對(duì)上述研究的影響。用HPLC和LC/MS方法判斷EGCG在培養(yǎng)基中的穩(wěn)定性。 MTT結(jié)果表明：EGCG對(duì)HT-29、MCF-7和Hela三種細(xì)胞生長(zhǎng)的抑制作用呈現(xiàn)濃度依賴(lài)性。培養(yǎng)基中加入SOD后，EGCG對(duì)這三種細(xì)胞生長(zhǎng)的抑制作用增強(qiáng)。培養(yǎng)中LDH的活性在加入SOD后升高，表明在SOD存在的情況下EGCG對(duì)細(xì)胞的毒性作用增強(qiáng)。HT-29細(xì)胞在E

4、GCG作用下凋亡率低，SOD加入后使EGCG促凋亡作用有所上升。EGCG在培養(yǎng)這三種細(xì)胞的培養(yǎng)基中的半衰期大約為1h或45min；加入SOD后，EGCG的半衰期提高到8h，表明SOD使培養(yǎng)基中EGCG的穩(wěn)定性增強(qiáng)。LC/MS分析表明：EGCG在本研究中的自氧化產(chǎn)物可能含有P2(分質(zhì)量884)和脫氫二聚體(分子量912)。可見(jiàn)，SOD使EGCG的穩(wěn)定性提高，使其抑制腫瘤細(xì)胞增殖的作用增強(qiáng)。因此，在以后有關(guān)EGCG在細(xì)胞培養(yǎng)基中的研究不能忽