表沒(méi)食子兒茶素沒(méi)食子酸酯對(duì)牛卵母細(xì)胞體外成熟和冷凍精液品質(zhì)的影響.pdf

1、活性氧自由基(Reactive oxygen species，ROS)在維持哺乳動(dòng)物雌雄配子正常的生理功能方面發(fā)揮著重要作用，但過(guò)量ROS會(huì)導(dǎo)致氧化應(yīng)激從而對(duì)哺乳動(dòng)物雌雄配子造成損傷。表沒(méi)食子兒茶素沒(méi)食子酸酯（epigallocatechin-3-gallate，EGCG）是茶葉中兒茶素的一種主要成分，因其具有強(qiáng)抗氧化特性而被認(rèn)為最有前景的生物活性物質(zhì)之一，它能清除ROS從而提高雌雄配子質(zhì)量。因此，本研究在牛體外卵母細(xì)胞成熟液和冷凍-解

2、凍后精液中添加不同濃度的EGCG探究其對(duì)牛卵母細(xì)胞體外成熟和冷凍精液品質(zhì)的影響。研究結(jié)果如下:
　　1、探究牛卵母細(xì)胞體外成熟培養(yǎng)液中添加不同濃度EGCG(0、25、50、100、200μM)對(duì)牛卵母細(xì)胞核成熟和胞質(zhì)成熟、卵丘擴(kuò)展、ROS水平、總抗氧化能力、早期凋亡和體外受精后早期胚胎發(fā)育能力的影響，并檢測(cè)卵母細(xì)胞內(nèi)抗氧化相關(guān)基因表達(dá)探究其可能的作用機(jī)制。結(jié)果表明:(1)與對(duì)照組相比，50μMEGCG顯著提高牛卵母細(xì)胞第一極體排出

3、率、皮質(zhì)顆粒外周和皮質(zhì)區(qū)分布的卵母細(xì)胞百分率和線粒體均勻分布的卵母細(xì)胞百分率(P＜005)。(2)與對(duì)照組相比，25μM和50μMEGCG顯著提高卵丘擴(kuò)展指數(shù)，50μMEGCG處理顯著促進(jìn)卵丘擴(kuò)展基因(HAS2、TNFA IP6、PTX和PTGS2)mRNA表達(dá)(P＜0.05)。(3)與對(duì)照組相比，50μMEGCG處理不僅顯著降低牛卵母細(xì)胞內(nèi)ROS水平和早期凋亡卵母細(xì)胞比例，還顯著提高牛卵母細(xì)胞總抗氧化能力(P＜0.05)。(4)50μ

4、MEGCG處理組牛卵母細(xì)胞體外受精后早期胚卵裂率和囊胚率顯著高于對(duì)照組(P＜0.05)。(5)50μMEGCG處理組牛卵母細(xì)胞中抗氧化相關(guān)基因(NRF2、SOD1、CAT和GPX4)mRNA表達(dá)量顯著高于對(duì)照組(P＜005)。
　　2、牛冷凍-解凍精液中添加不同濃度EGCG(0、5、10、20μM)385℃孵育1h后對(duì)精子活力及運(yùn)動(dòng)學(xué)參數(shù)、結(jié)構(gòu)完整性、精子中抗氧化相關(guān)酶活力、MDA含量和體外受精后早期胚胎發(fā)育能力進(jìn)行檢測(cè)。結(jié)果表明

5、:(1)10μM EGCG處理組精子活力(TM，％)和鞭打頻率(BCF,Hz)顯著高于對(duì)照組(P＜0.05)。(2)與對(duì)照組相比，5μM，10μM和20μEGCG處理組精子質(zhì)膜和頂體完整率顯著升高(P＜005);5μM和10μM EGCG處理組精子線粒體膜完整率顯著升高(P＜005)。(3)與對(duì)照組相比，10μM EGCG處理能夠顯著提高精子中SOD和CAT活力，降低LDH活力和MDA含量(P＜005)，但AST活力無(wú)顯著變化;20μM