胃癌及其癌前病變組織中Yes-associated protein和Survivin的表達(dá)及意義.pdf

1、目的： 檢測(cè)YAP和Survivin在正常胃黏膜、腸上皮化生、不典型增生及胃癌組織中的表達(dá)水平，分析二者表達(dá)的差異性和相關(guān)性，探討YAP及Survivin表達(dá)與胃癌發(fā)生的關(guān)系和意義。 方法： 臨床病理資料收集及組織芯片制作：收集中國(guó)醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院腫瘤外科手術(shù)切除胃癌標(biāo)本103例(同時(shí)距癌灶邊緣大于5cm處取配對(duì)正常胃黏膜作為對(duì)照)腸上皮化生71例，不典型增生40例，早期胃癌31例，進(jìn)展期胃癌72例。采用組織

2、芯片制作儀構(gòu)建胃癌及其癌前病變組織芯片，行4μm連續(xù)切片，其中一張行常規(guī)HE染色，其它室溫保存?zhèn)溆谩?免疫組化染色及結(jié)果判定方法：采用PV9000免疫組化方法檢測(cè)胃癌及其癌前病變中YAP和Survivin的表達(dá)水平。YAP兔抗人多克隆抗體(工作濃度1:25)購(gòu)自CST(Cell Signaling Technology)公司，Survivivn兔抗人多克隆抗體(工作液)購(gòu)自福州邁新生物有限公司，免疫組化試劑盒及DAB顯色系統(tǒng)購(gòu)自

3、北京中杉生物有限公司。已知陽(yáng)性組織片做陽(yáng)性對(duì)照，用PBS代替一抗作為陰性對(duì)照。結(jié)果判定方法：YAP在細(xì)胞核和/或細(xì)胞漿呈現(xiàn)清晰棕黃色特異性免疫反應(yīng)顆粒者、Survivin在細(xì)胞漿呈現(xiàn)清晰棕黃色特異性免疫反應(yīng)顆粒者為陽(yáng)性反應(yīng)細(xì)胞。每個(gè)病例選擇2個(gè)有代表的高倍視野，計(jì)數(shù)200個(gè)細(xì)胞，染色強(qiáng)度以陽(yáng)性細(xì)胞呈色反應(yīng)為準(zhǔn)：無(wú)特異性著色為0分，淺棕色為1分，棕黃色為2分，深棕黃為3分：染色的陽(yáng)性細(xì)胞所占比例按下列標(biāo)準(zhǔn)評(píng)定記分：陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)<5％為0分，

4、5％～25％為1分，26070～50％為2分，51％～75％為3分，>75％計(jì)為4分。然后按染色強(qiáng)度和陽(yáng)性細(xì)胞所占的百分比的乘積將結(jié)果分為：0分，陰性(-)；1～4分，弱陽(yáng)性(+)；5～8分，中度陽(yáng)性(++)；9～12分，強(qiáng)陽(yáng)性(+++)。 結(jié)果： 除去抗原修復(fù)造成部分組織的脫落，最終可用病例為遠(yuǎn)癌正常胃黏膜98例，腸上皮化生58例，不典型增生32例，早期胃癌29例，進(jìn)展期胃癌69例。YAP在細(xì)胞核和/或細(xì)胞漿呈現(xiàn)清晰棕

5、黃色特異性免疫反應(yīng)顆粒、Survivin在細(xì)胞漿呈現(xiàn)清晰棕黃色特異性免疫反應(yīng)顆粒者為陽(yáng)性反應(yīng)細(xì)胞。 YAP在不典型增生(12/32，37.5％)、胃癌組織(47/98，48.0％)中的陽(yáng)性表達(dá)率顯著高于正常胃黏膜組織(13/98，13.3％)，P<0.01；YAP的陽(yáng)性表達(dá)率在正常胃黏膜與腸上皮化生(16/58，27.6％)、不典型增生與胃癌組之間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P>0.05。高分化(4/12，33.3％)，中分化(11/2

6、5，44.0％)，低分化(24/41，58.5％)腺癌中YAP陽(yáng)性表達(dá)率有逐漸增高趨勢(shì)，P=0.079。Lauren分型中YAP在彌漫型胃癌(31/59，52.5％)中的陽(yáng)性表達(dá)率較腸型胃癌表達(dá)率(16/39，41.0％)有增高趨勢(shì)，伴淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移胃癌組YAP的陽(yáng)性表達(dá)率(24/52，46.2％)較無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移胃癌組(5/17，29.4％)也有增高趨勢(shì)，但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P>0.05。另外，YAP的表達(dá)與患者性別、年齡、胃癌大體分型間無(wú)

7、顯著關(guān)聯(lián)性，P>0.05。 Survivin在腸上皮化生(31/58，53.4％)、不典型增生(19/32，59.4％)及胃癌(64/98，65.3％)組織中的陽(yáng)性表達(dá)率顯著高于正常胃粘膜組織(11/98，11.2％)中的陽(yáng)性表達(dá)率，P<0.01；腸上皮化生組與不典型增生組、不典型增生與胃癌組之間Survivin陽(yáng)性表達(dá)率差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P>0.05。高分化(5/12，41.7％)，中分化(14/25，58.3％)，低分化(

8、31/41，75.6％)腺癌中Survivin陽(yáng)性表達(dá)率逐漸增高，且具有等級(jí)相關(guān)性，rk=0.279，P<0.01。Lauren分型中，彌漫型胃癌組(44/59，74.6％) Survivin的陽(yáng)性表達(dá)率顯著高于腸型胃癌組(20/39，51.3％)，P<0.05。伴淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移胃癌組Survivin的陽(yáng)性表達(dá)率(40/52，76.9％)顯著高于無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組(7/17，41.2％)，P<0.01。Survivin的表達(dá)與患者年齡、性別、胃

9、癌大體分型無(wú)顯著關(guān)聯(lián)性，P>0.05。 在98例胃癌組織中YAP與Survivin表達(dá)呈正相關(guān)，等級(jí)相關(guān)系數(shù)rk=0.246，P<0.01。 結(jié)論： YAP在不典型增生及胃癌組織中的陽(yáng)性表達(dá)率顯著高于正常胃粘膜，提示YAP可能作為致癌因子參與了胃癌的發(fā)生并可能是胃黏膜癌變的早期事件分子；YAP表達(dá)在正常胃黏膜和腸上皮化生、不典型增生和胃癌中差異無(wú)顯著性。在高、中、低分化管狀腺癌中，YAP表達(dá)率有逐漸增高趨勢(shì)；YA

10、P表達(dá)在伴淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移胃癌組較無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移胃癌組也有增高趨勢(shì)，但無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。YAP在腫瘤細(xì)胞分化及淋巴轉(zhuǎn)移中是否發(fā)揮作用有待迸一步研究。 Survivin在腸上皮化生、不典型增生及胃癌中的陽(yáng)性表達(dá)率顯著高于正常胃粘膜組織中的陽(yáng)性表達(dá)率；在高、中、低分化管狀腺癌中，YAP陽(yáng)性表達(dá)率逐漸升高并具有等級(jí)相關(guān)性；Lauren分型中，彌漫性胃癌組陽(yáng)性表達(dá)率顯著高于腸型胃癌組：伴淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移胃癌組的陽(yáng)性表達(dá)率顯著高于無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移胃癌組，提示