2023年全國(guó)碩士研究生考試考研英語(yǔ)一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁(yè)
已閱讀1頁(yè),還剩48頁(yè)未讀, 繼續(xù)免費(fèi)閱讀

下載本文檔

版權(quán)說(shuō)明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請(qǐng)進(jìn)行舉報(bào)或認(rèn)領(lǐng)

文檔簡(jiǎn)介

1、背景:涎腺腺樣囊性癌是涎腺上皮來(lái)源的惡性程度最高的腫瘤之一,其顯著生物學(xué)特征為早期浸潤(rùn)性,病患常常累及神經(jīng),使患者因疼痛和神經(jīng)麻痹,導(dǎo)致相應(yīng)的功能障礙。手術(shù)切除是其首選的治療方法,根治性手術(shù)需要擴(kuò)大切除,術(shù)后的復(fù)發(fā)率居高不下,并且預(yù)后較差,給患者帶來(lái)巨大痛苦,因此亟需更好的手段治療。致使腫瘤發(fā)生的因素很多,其中抑癌基因?qū)τ谀[瘤發(fā)生發(fā)展的作用極為重要,并成為腫瘤靶向治療的重要候補(bǔ)靶點(diǎn)。目前已發(fā)現(xiàn)一些與腺樣囊性癌發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)的抑癌基因以

2、及癌基因,比如:P53、c-erbB-2、Beclinl等。PTEN基因的全稱為人類第10號(hào)染色體缺失的磷酸酶及張力蛋白同源基因(phosphataseand tensin homologue deleted chromatosome ten,PTEN),作為迄今為止發(fā)現(xiàn)的第一個(gè)具有雙重特異性磷酸酶作用的抑癌基因,近年來(lái)得到了廣泛關(guān)注。大量的研究顯示,PTEN基因在腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)、細(xì)胞增殖及分化、細(xì)胞凋亡、細(xì)胞黏附能力、遷移和侵襲能力,及

3、其他腫瘤生物學(xué)行為起重要的調(diào)控作用,PTEN基因功能缺失可以影響多種組織來(lái)源腫瘤的發(fā)生發(fā)展與轉(zhuǎn)歸,但是在涎腺腺樣囊性癌的發(fā)生及發(fā)展過(guò)程中PTEN基因的作用尚少見文獻(xiàn)報(bào)道。SACC-83細(xì)胞系是1983年從一位26歲女性患者的舌下腺腺樣囊性癌的術(shù)后標(biāo)本中分離、培養(yǎng)并鑒定的,已被廣泛應(yīng)用在腫瘤發(fā)生發(fā)展與轉(zhuǎn)移研究中,例如在SACC-83細(xì)胞系中將C-ebB2基因利用RNA干擾技術(shù)將其表達(dá)下調(diào)可以發(fā)現(xiàn)SACC-83細(xì)胞的增殖受到了抑制,但PTE

4、N基因在SACC-83細(xì)胞系的表達(dá)與作用尚未見報(bào)道。
  目的:下調(diào)涎腺腺樣囊性癌SACC-83細(xì)胞系中抑癌基因PTEN的表達(dá),在體外觀察PTEN對(duì)SACC-83細(xì)胞系生物學(xué)行為的改變,研究PTEN基因?qū)ο严傧贅幽倚园┌l(fā)生發(fā)展的調(diào)控作用。
  方法:利用Lipofectamine2000試劑盒將干擾RNA轉(zhuǎn)染到SACC-83細(xì)胞系中建立PTEN下調(diào)的細(xì)胞;在蛋白水平上應(yīng)用Western Blot實(shí)驗(yàn)方法檢驗(yàn)下調(diào)PTEN基因是

5、否成功;利用CCK8細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)和細(xì)胞克隆實(shí)驗(yàn)研究PTEN基因下調(diào)后SACC-83細(xì)胞的增殖生長(zhǎng)的情況;Brdu摻入實(shí)驗(yàn),進(jìn)一步定位明確PTEN基因干擾下調(diào)后對(duì)SACC-83細(xì)胞增殖方面的影響;應(yīng)用Transwell和Matrigel建立體外人工基底膜侵襲模型,分析細(xì)胞的侵襲能力。另外應(yīng)用經(jīng)典的細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)以及Transwell小室不加人工基底膜的方式,觀察SACC-83細(xì)胞的遷移能力。利用細(xì)胞黏附實(shí)驗(yàn),檢測(cè)細(xì)胞的黏附能力改變;應(yīng)用流式

6、細(xì)胞周期實(shí)驗(yàn)分析細(xì)胞周期的變化。數(shù)據(jù)結(jié)果利用SPSS17.0進(jìn)行分析。
  結(jié)果:1.Western Blot結(jié)果顯示,干擾RNA轉(zhuǎn)染可在蛋白水平上成功下調(diào)SACC-83細(xì)胞中PTEN的表達(dá)。2.CCK8實(shí)驗(yàn)、細(xì)胞克隆實(shí)驗(yàn)以及Brdu摻入實(shí)驗(yàn)的結(jié)果分析顯示,PTEN基因下調(diào)后SACC-83細(xì)胞的增殖能力增強(qiáng)。3.Transwell加Matrigel膠實(shí)驗(yàn)顯示,細(xì)胞干擾后穿越小室的細(xì)胞數(shù)量增多,說(shuō)明細(xì)胞對(duì)基底膜侵襲能力提高。應(yīng)用Tr

7、answell不加Matrigel膠建立的體外細(xì)胞運(yùn)動(dòng)模型和細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)表明,PTEN基因下調(diào)組細(xì)胞的遷移能力明顯下降。4.細(xì)胞黏附實(shí)驗(yàn)顯示,PTEN基因下調(diào)組的黏附能力增強(qiáng)。5.流式細(xì)胞周期實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,PTEN基因下調(diào)細(xì)胞在S期細(xì)胞數(shù)量比例增大;G1期的細(xì)胞比例減少。
  結(jié)論:在體外培養(yǎng)的涎腺腺樣囊性癌SACC-83細(xì)胞中下調(diào)PTEN基因表達(dá),可以顯著促進(jìn)細(xì)胞增殖、侵襲、遷移和黏附能力,提示了抑癌基因PTEN可調(diào)控涎腺腺樣囊

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無(wú)特殊說(shuō)明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請(qǐng)下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請(qǐng)聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁(yè)內(nèi)容里面會(huì)有圖紙預(yù)覽,若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
  • 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 眾賞文庫(kù)僅提供信息存儲(chǔ)空間,僅對(duì)用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理,對(duì)用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對(duì)任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
  • 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請(qǐng)與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時(shí)也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對(duì)自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

最新文檔

評(píng)論

0/150

提交評(píng)論