葛根血清藥物化學(xué)動態(tài)研究.pdf

1、目的：建立大鼠體內(nèi)葛根血清藥物化學(xué)動態(tài)指紋圖譜研究的高效液相色譜方法，對大鼠灌胃葛根提取物后不同時間點(diǎn)血漿中化學(xué)成分進(jìn)行分析，同時對葛根中主要活性成分大豆苷元、葛根素的藥動學(xué)進(jìn)行研究。 方法：以Cosmosil C-18柱為分析柱，采用流動相甲醇(A)與1﹪醋酸(B)進(jìn)行梯度洗脫，用DAD檢測器190～400 nm進(jìn)行檢測，254 nm進(jìn)行數(shù)據(jù)采集，柱溫為40℃，流速為0.8 ml/min。大鼠灌胃葛根提取物后0～240min內(nèi)

2、于大鼠股動脈采集血樣，用6﹪高氯酸處理血漿，以非那西丁為內(nèi)標(biāo)。處理后的血樣采用HPLC分析建立葛根血清藥物化學(xué)動態(tài)色譜圖，同時，對大豆苷元、葛根素進(jìn)行定量分析，繪制血藥濃度-時間曲線圖，用DAS1.0軟件估算相應(yīng)的藥動學(xué)參數(shù)。 結(jié)果：①給大鼠灌胃葛根提取物(4 g/kg)后在0，2，5，10，15，20，30，60，90，120，180和240分鐘的血清化學(xué)圖譜中，先后有7個峰出現(xiàn)，且峰面積隨時間不同呈動態(tài)變化。其來源可能有以下

3、三方面：a．葛根提取物中的原型物質(zhì)直接進(jìn)入體內(nèi)；b．藥物的代謝產(chǎn)物；c．藥物作用于機(jī)體后產(chǎn)生的內(nèi)源性物質(zhì)。 ②葛根素和大豆苷元的標(biāo)準(zhǔn)曲線分別為y=3.4403x-0.1030(0.2-20.0μg/mL)和y=5.4474x+0.2222(0.1-10.0/μg/mL)，其相關(guān)系數(shù)分別為0.9991和0.9992。日內(nèi)日間準(zhǔn)確度均高于96﹪，精密度RSD均小于6﹪，回收率均大于98﹪，其最低定量限分別為10和20 ng/mL。在

4、以4 g/kg的劑量(分別相當(dāng)于葛根素173.25 mg/kg大豆苷元67.5 mg/kg)給大鼠灌胃葛根提取物之后，葛根素吸收半衰期t<,1/2ka>=0.010 h，消除半衰期t<,1/2β=1.4 h，達(dá)峰時間為T<,max>=0.16 h，最高血藥濃度為C<,max>=8.375μg/mL；大豆苷元吸收半衰期t<,1/2ka>=0.019 h，消除半衰期t<,1/2β>=5.2 h，達(dá)峰時間為T<,max>=0.11 h，最高血

5、藥濃度為C<,max>=1.767μg/mL。 結(jié)論：①葛根提取物給大鼠灌胃給藥后，隨著時間的推移，血清中的移行成分會發(fā)生質(zhì)與量的動態(tài)變化。因此，在血清藥物化學(xué)研究中，僅僅在給藥后單一時間點(diǎn)采集血樣進(jìn)行研究所得的數(shù)據(jù)不全面。 ②本文建立的高效液相色譜方法，簡單、靈敏、準(zhǔn)確，可用于葛根血清藥物化學(xué)動態(tài)指紋圖譜及葛根素、大豆苷元的藥動學(xué)研究。 創(chuàng)新性：①首次描述了大鼠灌胃葛根提取物后的血清藥物化學(xué)動態(tài)指紋圖譜，并對血