復方丹參片血清藥物化學及代謝組學研究.pdf

1、復方丹參片是由丹參（Radix Salviae Miltiorrhizae）、三七（Radix Notoginseng）和冰片（Borneolum Syntheticum）三味中藥制成的現(xiàn)代中藥制劑，收載于2005版中華人民共和國藥典第一部，具有活血化瘀、理氣止痛之功效。自20世紀70年代問世以來，復方丹參片在治療心血管疾病方面取得了顯著的成效，被廣泛用來治療心肌梗死和冠心病。臨床上，關于復方丹參片改善心臟功能的機制可謂是眾說紛紜，包括

2、降低血中脂質、抑制血栓形成等。到目前為止，還沒有任何一個研究能夠系統(tǒng)地闡釋復方丹參片的作用機制。另外，值得注意的是復方丹參片中化學成分眾多，但并非所有的成分都是有效成分。在藥效物質基礎不夠明確的情況下，中藥復方作用機制的研究確實很難取得實質性的進展。因此，本文旨在揭示復方丹參片藥效物質基礎的前提下繼續(xù)深入研究其治療心肌缺血的作用機制。
　　 眾所周知，中藥復方是在病證結合、方證對應、理法方藥一致的條件下，通過多組分作用在多靶點，

3、融拮抗、補充、整合、調節(jié)等多種功效于一體而起到治療作用。由此可見，中藥復方的藥效作用十分注重系統(tǒng)性和整體性。所以，對中藥藥效物質基礎及作用機制的研究也應從整體入手。在眾多的研究方法中，血清藥物化學和代謝組學都十分注重整體的研究，這與中醫(yī)的整體觀思維不謀而合：血清藥物化學方法通過分析給藥后血清中的藥物移行成分，研究有效成分在體內的吸收、代謝情況，用以闡明藥物的整體體內過程；代謝組學方法通過分析內源性代謝物群的改變，判別機體代謝網絡所處的狀

4、態(tài)，用于疾病診斷和藥物作用機制的研究。
　　 在血清藥物化學和代謝組學兩大理論的指導下，本文采用液相色譜串聯(lián)質譜等分析方法，通過整體動物實驗，對復方丹參片藥效物質基礎及其治療心肌缺血的作用機制進行了較系統(tǒng)的研究。主要研究內容如下：
　　 1）在血清藥物化學理論指導下，利用快速液相色譜串聯(lián)四極桿飛行時間質譜（RRLC-Q-TOF/MS），檢測復方丹參片的入血成分和代謝產物，即通過比較給藥前后大鼠的代謝指紋圖譜，尋找并鑒定給

5、藥后血清中新出現(xiàn)的化學成分。
　　 2）在代謝組學理論指導下，利用超高壓液相色譜串聯(lián)四極桿飛行時間白質譜（UPLC-Q-TOF/MS），鑒定心肌缺血的生物標志物，即通過比較造模前后大鼠的代謝指紋圖譜，尋找并鑒定造模后呈現(xiàn)特征性改變的內源性代謝物。
　　 3）在心肌缺血模型代謝組學研究的基礎上，進一步研究常見五種常見西藥（異硝酸山梨酯，普奈洛爾，維拉帕米，卡托普利，曲美他嗪）與中藥（復方丹參片及其有效成分）對心肌缺血大鼠的

6、保護作用，通過中西藥對比的方式，初步闡釋了復方丹參片及其有效成分（丹參酮ⅡA、丹參酚酸B）治療心肌缺血的作用機制。
　　 通過上述研究，本文在給藥大鼠血清中檢測到復方丹參片的14個原型成分和8個代謝產物，其中丹參醛、丹參新醌B、丹參素的糖結合物（M1）和丹參新醌B的甲基化產物（M8）等是利用LC-MS方法首次在大鼠體內檢測到；在心肌缺血大鼠血漿中發(fā)現(xiàn)并最終鑒定了與疾病相關的22生物標志物，其中7個標志物同時出現(xiàn)在嘌呤代謝途徑中，