補(bǔ)骨脂化學(xué)成分和大鼠血清藥物化學(xué)初步研究.pdf

1、目的：本研究旨在從補(bǔ)骨脂藥材中分離出單體化合物，從中篩選出具有抗氧化活性和抗腫瘤活性的化合物；闡明補(bǔ)骨脂水提物在大鼠血漿中的主要入血成分和補(bǔ)骨脂乙素在大鼠體內(nèi)的藥物代謝過程。
　　方法：
　　1.運(yùn)用硅膠柱色譜、制備薄層色譜、制備高效液相色譜等現(xiàn)代分離手段對補(bǔ)骨脂甲醇浸膏和70％乙醇浸膏進(jìn)行分離，利用核磁共振技術(shù)（NMR）和電噴霧電離質(zhì)譜（ESI-MS）鑒定了化合物的結(jié)構(gòu)。
　　2.采用ABTS（2,2-聯(lián)氮基-雙-(

2、3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二氨鹽）快速檢測法和DPPH（1,1-二苯基-2-三硝基苯肼）法評價了化合物的抗氧化活性，MTT（噻唑藍(lán)）法評價了化合物對人肝癌細(xì)胞HepG2和人乳腺癌細(xì)胞MDA-MB-231的抗增殖作用。
　　3.大鼠灌胃給予補(bǔ)骨脂水提物，以已經(jīng)確定結(jié)構(gòu)的化合物為對照品，建立 LC-MS/MS方法，從大鼠血漿中找出補(bǔ)骨脂的主要入血成分。
　　4.補(bǔ)骨脂乙素按80 mg/kg的劑量單次灌胃給藥，大鼠眼眶定點取血

3、，建立 LC-MS/MS方法，測定每個時間點血漿中藥物濃度，制備藥時曲線，以 DAS軟件處理擬合數(shù)據(jù)，計算其相關(guān)藥代動力學(xué)參數(shù)。
　　結(jié)果：
　　1.從補(bǔ)骨脂中分離得到18個化合物，經(jīng)鑒定為苯丙素類化合物：補(bǔ)骨脂素（1）、異補(bǔ)骨脂素（2）、補(bǔ)骨脂定（3）、補(bǔ)骨脂苷（4）、異補(bǔ)骨脂苷（5）；單萜酚類化合物：雙補(bǔ)骨脂酚 A（6）、雙補(bǔ)骨脂酚 B（7）、補(bǔ)骨脂酚（8）、13-hydroxyisobakuchiol（9）、12,13

4、-二氫-12,13-環(huán)氧補(bǔ)骨樹脂酚（10）；黃酮類化合物：補(bǔ)骨脂乙素（11）、異補(bǔ)骨脂色烯查爾酮（12）、次甘草查爾酮（13）、新補(bǔ)骨脂異黃酮（14）、補(bǔ)骨脂寧（15）、補(bǔ)骨脂二氫黃酮（16）、異補(bǔ)骨脂二氫黃酮（17）、補(bǔ)骨脂二氫黃酮甲醚（18）。
　　2.化合物3，6，7，12具有較強(qiáng)的清除DPPH自由基的作用；化合物8~9，11~14，16具有清除ABTS自由基的作用；化合物3，8~9，11~18對人肝癌細(xì)胞HepG2和人乳腺

5、癌細(xì)胞MDA-MB-231具有抗增殖作用,化合物7對人肝癌細(xì)胞HepG2有一定抗增殖作用。
　　3.化合物1，2，4，5，11~14，16~18是補(bǔ)骨脂在大鼠血漿中的主要移行成分。
　　4.補(bǔ)骨脂乙素在大鼠體內(nèi)的主要藥代動力學(xué)參數(shù)分別為：達(dá)峰時間（Tmax）：2.25±0.52 h，最大濃度（Cmax）：351.2±229.2 ng/mL，半衰期（T1/2）：6.15±1.99 h，時間曲線下面積（AUC(0–∞)）：166

6、5.5±270.9 ng/mL· h，清除率（CL/F）：9.86±1.78 L/h，表觀分布容積（V/F）：90.34±47.17 L。
　　結(jié)論：
　　1.從補(bǔ)骨脂中分離出18種化合物。其中，補(bǔ)骨脂定、雙補(bǔ)骨脂酚A、雙補(bǔ)骨脂酚B、補(bǔ)骨脂酚、13-hydroxyisobakuchiol、補(bǔ)骨脂乙素、異補(bǔ)骨脂色烯查爾酮、次甘草查爾酮、新補(bǔ)骨脂異黃酮、補(bǔ)骨脂二氫黃酮具有抗氧化活性；補(bǔ)骨脂定、雙補(bǔ)骨脂酚B、補(bǔ)骨脂酚、13-hyd

7、roxyisobakuchiol、補(bǔ)骨脂乙素、異補(bǔ)骨脂色烯查爾酮、次甘草查爾酮、新補(bǔ)骨脂異黃酮、補(bǔ)骨脂寧、補(bǔ)骨脂二氫黃酮、異補(bǔ)骨脂二氫黃酮、補(bǔ)骨脂二氫黃酮甲醚具有抗腫瘤活性。
　　2.補(bǔ)骨脂水提物在大鼠血漿中的主要入血成分是補(bǔ)骨脂素、異補(bǔ)骨脂素、補(bǔ)骨脂苷、異補(bǔ)骨脂苷、補(bǔ)骨脂乙素、異補(bǔ)骨脂色烯查爾酮、次甘草查爾酮、新補(bǔ)骨脂異黃酮、補(bǔ)骨脂二氫黃酮、異補(bǔ)骨脂二氫黃酮、補(bǔ)骨脂二氫黃酮甲醚。
　　3.首次報道了檢測大鼠血漿中補(bǔ)骨脂乙素