生地黃血清藥物化學(xué)研究.pdf

1、目的:對(duì)生地黃藥效及血清物質(zhì)進(jìn)行研究,通過(guò)比較生地黃藥材,正常血清,陰虛、血熱模型動(dòng)物含藥血清HPLC色譜圖的差異,探討其清熱涼血,養(yǎng)陰生津的物質(zhì)基礎(chǔ)。
　　方法:
　　(1)生地黃HPLC色譜研究
　　采用高效液相色譜法建立生地黃HPLC色譜圖。色譜條件:以DikmaPlatisilC18柱為分析柱,275nm為檢測(cè)波長(zhǎng),乙腈與0.1％磷酸水為流動(dòng)相梯度洗脫,流速為1.0mL/min,柱溫為30℃。
　　(2)

2、生地黃對(duì)陰虛大鼠模型的影響
　　灌胃甲狀腺素片復(fù)制陰虛大鼠模型,觀察生地黃對(duì)陰虛模型大鼠的影響。實(shí)驗(yàn)周期28天,觀察造模后各組大鼠行為表現(xiàn),體重,體溫,檢測(cè)血清T3、T4、Cort含量,取各組大鼠腎上腺,甲狀腺,進(jìn)行病理觀察。
　　(3)生地黃對(duì)血熱出血大鼠模型的影響
　　腹腔注射內(nèi)毒素及皮下注射酵母復(fù)制血熱出血大鼠模型,觀察生地黃對(duì)血熱出血模型大鼠的影響。觀察造模后各組大鼠行為表現(xiàn),體溫,檢測(cè)凝血四項(xiàng)指標(biāo),取各組大鼠

3、肺、肝、腎進(jìn)行病理觀察。
　　(4)生地黃含藥血清HPLC色譜研究
　　建立各組生地黃含藥血清HPLC色譜圖。比較生地黃藥材及含藥血清,空白血清HPLC色譜圖的差異,探討生地黃滋陰和清熱涼血功效的物質(zhì)基礎(chǔ)。
　　結(jié)果:
　　(1)建立了生地黃HPLC色譜圖,以5-羥甲基糠醛為參照峰,確定9個(gè)共有峰;通過(guò)方法學(xué)驗(yàn)證,精密度、穩(wěn)定性、重復(fù)性實(shí)驗(yàn)中相對(duì)峰面積和相對(duì)保留時(shí)間RSD均小于5%,表明樣品溶液在24h內(nèi)穩(wěn)定性良

4、好,系統(tǒng)重復(fù)性、儀器精密度等均良好;通過(guò)相似度評(píng)價(jià),比較了五批生地黃藥材的相似度都在0.86以上,表明生地黃質(zhì)量均一,穩(wěn)定。
　　(2)對(duì)陰虛大鼠模型的影響:造模后,模型組大鼠出現(xiàn)皮毛疏松無(wú)光澤,易被激怒等現(xiàn)象。與正常組比較,模型組大鼠T3、Cort升高(P<0.05),體重增長(zhǎng)緩慢,體溫升高,甲狀腺及腎上腺出現(xiàn)明顯病理改變。經(jīng)生地黃及六味地黃丸治療后,各組T3、Cort均顯著降低(P<0.05),體重增長(zhǎng)加快,體溫降低,臟器病變

5、明顯減輕。
　　(3)對(duì)血熱出血大鼠模型的影響:造模后,模型組大鼠出現(xiàn)自發(fā)活動(dòng)減少,進(jìn)食減少,皮毛疏松等現(xiàn)象。與正常組比較,模型組大鼠APTT延長(zhǎng);PT延長(zhǎng)、FIB增加(P<0.05),TT縮短(P<0.05),基礎(chǔ)體溫升高,肺、肝、腎均出現(xiàn)明顯的病理改變。經(jīng)生地黃治療后FIB減少,TT延長(zhǎng),體溫降低,大鼠臟器病變減輕。
　　(4)陰虛實(shí)驗(yàn)生地黃血清HPLC色譜研究中,發(fā)現(xiàn)生地黃高、低劑量組及六味地黃丸組血清均在相同保留時(shí)間

6、出現(xiàn)了一個(gè)新的色譜峰(3號(hào)峰),血清中1、4號(hào)峰峰面積發(fā)生了變化;血熱實(shí)驗(yàn)生地黃血清HPLC色譜研究中,發(fā)現(xiàn)生地黃給藥組血清中出現(xiàn)了一個(gè)新的色譜峰(2號(hào)峰),血清中1號(hào)峰峰面積發(fā)生了變化。
　　結(jié)論:建立了生地黃HPLC色譜圖,為進(jìn)一步開(kāi)展研究奠定了基礎(chǔ)。在生地黃藥效實(shí)驗(yàn)中,初步證實(shí)了生地黃及生地黃多糖的養(yǎng)陰功效,生地黃清熱涼血的功效。生地黃養(yǎng)陰作用的物質(zhì)基礎(chǔ)可能和生地黃多糖、5-羥甲基-2-糠酸有關(guān),其作用機(jī)制可能與對(duì)血清中1、