滋補肝腎通絡(luò)解毒中藥協(xié)同治療左旋多巴誘導(dǎo)異動癥的機(jī)理.pdf

1、帕金森病(Parkinson's disease,PD)是一種常見于中老年的神經(jīng)系統(tǒng)變性疾病,多在60歲以后發(fā)病。其主要表現(xiàn)為患者動作緩慢,四肢或軀體震顫,身體失去了柔軟性而變得僵硬。目前臨床治療帕金森病的首選藥物為L-dopa。左旋多巴誘導(dǎo)異動癥(levodopa-induced dyskinosias,LID)是長期服用L-dopa患者中普遍出現(xiàn)的并發(fā)癥,主要表現(xiàn)為舞蹈癥和手足徐動癥,嚴(yán)重影響帕金森病患者的日常生活質(zhì)量。對于異動癥目

2、前尚無很好的解決方法,臨床只能依靠受體激動劑等減緩癥狀。目前關(guān)于異動癥的機(jī)理研究集中在多巴胺的波動性刺激,D1、D2受體的協(xié)調(diào)作用,“直接通路”上谷氨酸受體的影響以及蛋白和基因水平表達(dá)量的變化幾個方面。滋補肝腎通絡(luò)解毒中藥已在臨床與左旋多巴合用治療帕金森病以及L-dopa長期治療引起的波動性運動行為,被證明有明顯的減毒增效作用。中藥的協(xié)同作用機(jī)理可表現(xiàn)為抗膽堿能作用,受體激動劑作用,抗氧化作用以及調(diào)節(jié)相關(guān)基因表達(dá)。我們的實驗力求從以上幾

3、個方面探索滋補肝腎通絡(luò)解毒中藥協(xié)同L-dopa治療LID的作用機(jī)理。 本實驗采用兩點單側(cè)損毀大鼠腦黑質(zhì)多巴胺能神經(jīng)元的方法建立PD模型大鼠,之后加之以每日腹腔注射L-dopa總計一個月誘導(dǎo)形成LID大鼠模型。建模成功的LID大鼠分別以滋補肝腎通絡(luò)解毒中藥(以下簡稱中藥)灌胃協(xié)同L-dopa(腹腔注射),中藥,L-dopa,生理鹽水(腹腔注射)進(jìn)行治療。治療為期一個月,期間每周固定時間進(jìn)行AIM評分一次,評定行為學(xué)治療效果。治療一

4、個月后的大鼠分別運用實時定量PCR檢測mRNA表達(dá),用同位素標(biāo)記技術(shù)檢測受體親和力及對動物的氧化應(yīng)激相關(guān)指標(biāo)進(jìn)行檢測,以期找出中藥協(xié)同L-dopa治療LID產(chǎn)生作用的分子生物學(xué)機(jī)理。 通過單側(cè)雙點注射6-OHDA至大鼠腦中腦被蓋區(qū)以及黑質(zhì)網(wǎng)狀部,我們成功獲得了PD模型大鼠,建模成功率為40％。32只PD大鼠經(jīng)過腹腔注射L-dopa-個月后,有25只大鼠出現(xiàn)了符合AIM評分標(biāo)準(zhǔn)且大于20分以上的LID癥狀。 誘導(dǎo)成功的LI

5、D大鼠,在繼續(xù)治療一個月之后,中藥組和停藥組(生理鹽水)異動癥狀明顯減輕,中藥協(xié)同治療組在治療第四周后AIM評分較之西藥組有顯著差異(p<0.05)。在評分的120分鐘內(nèi),中藥協(xié)同治療組在第90min較之西藥組有顯著差異(p<0.05)。分項評分顯示中藥協(xié)同治療組主要在口面部異動以及上肢異動。隨著治療時間的延長異動癥狀有明顯的減弱(p<0.05)。經(jīng)過治療的LID模型大鼠,熒光實時定量PCR結(jié)果顯示,損毀側(cè)黑質(zhì)部位VMAT2在中藥組中表

6、達(dá)量較之正常大鼠升高,中藥協(xié)同治療組較之西藥組其表達(dá)量也有升高。這一趨勢同樣存在于TH以及DAT基因在損毀側(cè)黑質(zhì)部位的表達(dá)。但VMAT2增高的趨勢更明顯。 損毀側(cè)紋狀體D1、D2受體熒光實時定量PCR結(jié)果顯示,D1、D2受體在中藥協(xié)同治療組以及中藥組中的表達(dá)都高出正常大鼠水平,其中尤以D2受體中藥組表達(dá)升高明顯。同位素標(biāo)記D2受體親和力實驗證實,損毀側(cè)紋狀體D2受體雖然表達(dá)量普遍較正常組下降,但受體親和力升高。而中藥協(xié)同治療組較