興義鴨MEF2A、MEF2B、MEF2C和MEF2D基因克隆與組織時空表達研究.pdf

1、本研究以0至150日齡興義鴨為研究素材，利用RT-PCR結(jié)合A/T克隆的方法對肌細胞增強因子2家族（MEF2A、MEF2B、MEF2C和MEF2D）所有成員完整編碼區(qū)（CDS）序列進行克隆，并對四個成員序列進行相關(guān)生物信息學分析，同時運用實時熒光定量PCR（QRT-PCR）技術(shù)對興義鴨該基因家族四個基因在不同生長階段的心、肝、肺、腎、十二指腸、大腦、胸肌、腿肌、肌胃、腺胃10個組織的mRNA表達水平進行檢測，試驗主要研究成果如下：

2、>　　（1）成功克隆獲得了興義鴨MEF2A、MEF2B、MEF2C和MEF2D基因編碼區(qū)序列，全長分別為1479 bp、1221 bp、1104 bp（1308 bp）和1548 bp的開放閱讀框序列，分別編碼492、406、367（435）和515個氨基酸，同時發(fā)現(xiàn)興義鴨MEF2C基因可能存在兩種剪切方式。
　?。?）本研究首次克隆獲得鴨MEF2B基因CDS區(qū)序列，該片段包含起始密碼ATG和終止密碼TAG，經(jīng)序列比對與其他物種同

3、源性較高。經(jīng)NCBI在線預測mRNA保守結(jié)構(gòu)域，結(jié)果顯示其含有MADS-box保守結(jié)構(gòu)域，不含HJURP_C區(qū)域，符合脊椎動物MEF2B結(jié)構(gòu)特征。
　?。?）興義鴨MEF2基因家族實時熒光定量PCR檢測發(fā)現(xiàn)，該基因家族所有成員的mRNA在0、30、60、90、120和150日齡鴨的10個組織中均有不同程度的表達，經(jīng)統(tǒng)計分析，各基因的相對表達量在不同組織、不同階段以及不同性別之間均存在顯著差異。
　　各基因在性別之間的表達差異