牛體外受精中四個(gè)關(guān)鍵技術(shù)的研究.pdf

1、本研究的目的是為了優(yōu)化牛胚胎體外生產(chǎn)體系。 對(duì)卵巢內(nèi)卵母細(xì)胞體外成熟和體外受精進(jìn)行了研究。結(jié)果表明，將卵巢內(nèi)卵母細(xì)胞和2-8mm卵泡內(nèi)的卵母細(xì)胞共培養(yǎng)時(shí)，可以顯著的提高卵裂率和6-8細(xì)胞發(fā)育率(P＜0.05)；向成熟培養(yǎng)液中添加不同濃度(10％、20％、30％)的牛卵泡液(BFF)與不添加組的卵裂率和6-8細(xì)胞發(fā)育率差異不顯著(P＞0.05)，但牛卵泡液(BFF)可以有效的促進(jìn)卵巢內(nèi)卵母細(xì)胞的發(fā)育，各組中以添加10％(BFF)效

2、果最好；受精前脫去卵丘細(xì)胞將會(huì)顯著降低卵巢內(nèi)卵母細(xì)胞隨后的卵裂率(P＜0.05)。 性別分離精子采用上游法和Percoll法處理后發(fā)現(xiàn)，卵裂率和囊胚率差異不顯著(P＞0.05)，但Percoll法處理效果較好；分離精子和未分離精子體外受精效果表明，兩者的卵裂率和囊胚率差異不顯著(P＞0.05)。 研究了不同濃度的牛磺酸對(duì)牛早期胚胎體外發(fā)育的影響。結(jié)果表明，添加?；撬嵊欣谂Ｅ咛サ脑缙诎l(fā)育，但添加?；撬岣鹘M與不添加組之間差

3、異不顯著(P＞0.05)，添加7mmol/L的?；撬岬男Ч詈?。比較了不同濃度的氨基酸對(duì)早期牛胚胎體外發(fā)育的影響。結(jié)果顯示，氨基酸恰當(dāng)?shù)谋壤梢暂^好的促進(jìn)牛胚胎的發(fā)育，3×EAA+1×NEAA最適合牛胚胎的體外培養(yǎng)。研究了TCM199和mSOF培養(yǎng)液對(duì)牛胚胎早期發(fā)育的影響。發(fā)現(xiàn)TCM199和mSOF培養(yǎng)液都能夠很好的促進(jìn)牛胚胎的發(fā)育，兩者的卵裂率和囊胚率差異不顯著(P＞0.05)，mSOF可以代替TCM199用于牛胚胎的發(fā)育培養(yǎng)。