骨髓增生異常綜合征p15基因的表達(dá)缺失和啟動(dòng)子甲基化.pdf

1、背景：骨髓增生異常綜合征（myelodysplastic syndromes，MDS）是一組起源于造血干/祖細(xì)胞的異質(zhì)性惡性克隆性疾病，以外周血細(xì)胞減少、骨髓病態(tài)造血和高風(fēng)險(xiǎn)向白血病轉(zhuǎn)變?yōu)橹饕卣?。MDS的發(fā)病機(jī)制尚未明確，部分患者可發(fā)現(xiàn)原癌基因突變或者抑癌基因失活，這些基因的異常可能參與MDS的發(fā)生和發(fā)展。近年來，表觀遺傳學(xué)（epigenetics）研究越來越受到人們的關(guān)注，它是一門研究表觀遺傳異常的學(xué)科。表觀遺傳異常是指不涉及DNA

2、序列的變化、可遺傳的基因表達(dá)改變，主要包括DNA甲基化、組蛋白乙?；揎?、染色質(zhì)重塑和非編碼RNA調(diào)控等。DNA甲基化是最常見的表觀遺傳學(xué)修飾。DNA甲基化修飾與基因突變或純合子缺失等基因結(jié)構(gòu)變異不同，它不改變DNA的結(jié)構(gòu)序列，是一種可逆性的改變，通過逆轉(zhuǎn)啟動(dòng)子區(qū)甲基化可使失活的基因重新表達(dá)，因此可以成為腫瘤治療的新靶點(diǎn)。 目的：研究p15基因在骨髓增生異常綜合征（myelodysplastic syndromes，MDS）患者

3、骨髓中mRNA的表達(dá)水平及其啟動(dòng)子區(qū)甲基化情況，探討p15基因啟動(dòng)子區(qū)甲基化在MDS發(fā)生、發(fā)展中的作用。 方法：收集32例診斷明確的MDS患者及10例非惡性血液病患者的骨髓并提取單個(gè)核細(xì)胞，應(yīng)用甲基化特異性聚合酶鏈反應(yīng)（methylation-specific polymerase chain reaction，MS-PCR）檢測(cè)p15基因啟動(dòng)子區(qū)甲基化狀態(tài)；應(yīng)用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)（reverse transcription p

4、olymerase chain reaction，RT-PCR）檢測(cè)p15基因mRNA表達(dá)水平。 結(jié)果：32例MDS患者骨髓單個(gè)核細(xì)胞中有14例檢測(cè)到p15基因啟動(dòng)子區(qū)甲基化（甲基化陽性率為43．8％），陽性率明顯高于對(duì)照組，二者差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0．05）；高危型患者p15基因啟動(dòng)子區(qū)存在高頻甲基化；32例MDS患者中僅有10例檢測(cè)到p15基因mRNA的表達(dá)，而對(duì)照組均有p15mRNA的表達(dá)，二者差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0．

5、05）； p15mRNA表達(dá)缺失的22例MDS患者中有14例存在p15基因啟動(dòng)子區(qū)甲基化，其余10例p15基因mRNA表達(dá)的患者沒有檢測(cè)到p15基因啟動(dòng)子區(qū)甲基化，二者差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0．05）。 結(jié)論：骨髓增生異常綜合征的發(fā)生與p15基因啟動(dòng)子區(qū)CpG島甲基化密切相關(guān)，高危型患者p15基因啟動(dòng)子區(qū)CpG島存在高頻甲基化；p15基因啟動(dòng)子區(qū)CpG島甲基化導(dǎo)致p15基因表達(dá)缺失并進(jìn)一步抑制細(xì)胞的增殖分化，可能是MDS發(fā)生、發(fā)