鹽酸右美托咪啶對(duì)大鼠腸系膜動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞BKCa通道的影響.pdf

1、目的:鹽酸右美托咪啶通過激動(dòng)人體廣泛分布的α2腎上腺素能受體產(chǎn)生鎮(zhèn)靜、鎮(zhèn)痛、抗焦慮等作用,廣泛應(yīng)用于臨床麻醉及重癥監(jiān)護(hù)治療。持續(xù)輸注鹽酸右美托咪啶可能引起顯著的低血壓、心動(dòng)過緩等心血管系統(tǒng)不良反應(yīng),這些不良反應(yīng)的確切機(jī)制目前并不完全清楚。大電導(dǎo)鈣激活鉀通道(Large-conductance Ca2+-activated potassium channel,BKCa)廣泛存在于血管平滑肌細(xì)胞,在調(diào)節(jié)血管舒縮過程中起著重要作用。有關(guān)鹽酸右

2、美托咪啶的心血管不良反應(yīng)是否與對(duì)BKCa的作用有關(guān),尚未見有研究報(bào)道。本實(shí)驗(yàn)應(yīng)用膜片鉗單通道電流記錄技術(shù),觀察不同濃度鹽酸右美托咪啶對(duì)大鼠腸系膜動(dòng)脈平滑肌(mesenteric arterial smooth muscle, MASM)細(xì)胞BKCa通道的影響,以探討右美托咪啶引起低血壓的可能機(jī)制。
　　方法:解剖分離SD大鼠腸系膜動(dòng)脈血管,在手術(shù)顯微鏡下仔細(xì)剔除周圍脂肪和結(jié)締組織,經(jīng)急性酶分離后獲得單個(gè)平滑肌細(xì)胞。將所得平滑肌細(xì)胞

3、置于對(duì)稱性高鉀([K+]0:[K+]i=140:140mM)溶液中,使用膜片鉗技術(shù)記錄在+40mV去極化電壓條件下,不同濃度鹽酸右美托咪啶(0,10-9,10-8,10-7,10-6,10-5 M)在無鈣和鈣離子濃度為10-7mol/L浴液中單通道內(nèi)面向外式膜片(inside-out patch)上的電流。所得電流通過膜片鉗放大器(CEZ-2200)后輸入計(jì)算機(jī),用Pclamp(10.1)軟件系統(tǒng)進(jìn)行數(shù)據(jù)采集及分析通道開放概率(Open

4、 Probability, Po),電流幅度值(Amplitude, Amp),平均開放時(shí)間(mean open Time, To)和平均關(guān)閉時(shí)間(mean close Time,Tc)。
　　結(jié)果:1.在對(duì)稱性高鉀溶液中,內(nèi)面向外式膜片上,記錄到的大鼠腸系膜動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞BKCa通道電導(dǎo)值為216.38±5.92pS(n=8),通道具有電壓依賴性和鈣敏感性,48mM的四乙胺(TEA)幾乎能完全阻斷通道活動(dòng)。2.在對(duì)稱性高鉀、無鈣

5、溶液中,內(nèi)面向外式膜片上,各濃度組鹽酸右美托咪啶均未引起通道Po、Amp、To及Tc的改變。3.在對(duì)稱性高鉀、鈣離子濃度為10-7mM溶液中,內(nèi)面向外式膜片上,與對(duì)照組(鹽酸右美托咪啶=0M)比較,胞內(nèi)鹽酸右美托咪啶為10-9、10-8 M時(shí)并未引起B(yǎng)KCa通道開放概率的增加,但已明顯縮短通道平均關(guān)閉時(shí)間(p<0.01)。隨著胞內(nèi)鹽酸右美托咪啶濃度的進(jìn)一步增加(10-7～10-5 M),除通道平均關(guān)閉時(shí)間明顯縮短外,BKCa通道開放概率