肝細(xì)胞肝癌患者手術(shù)前后差異代謝物的研究.pdf

1、目的：在特定的環(huán)境和時間條件下，代謝組學(xué)技術(shù)能夠定量測定生物體內(nèi)源性代謝物的整體及其變化規(guī)律，確定正常的代謝機(jī)制，以及如何把異常的代謝機(jī)制應(yīng)用于臨床。本研究借助超高效液相色譜與質(zhì)譜聯(lián)用(UPLC-MS)代謝組學(xué)研究平臺，對肝細(xì)胞肝癌(HCC)患者手術(shù)前后血清代謝輪廓變化進(jìn)行分析，并對比健康人群的代謝輪廓，從更加直觀的角度詮釋肝癌手術(shù)切除前后患者機(jī)體小分子內(nèi)源性物質(zhì)層面的變化態(tài)勢，分析這一趨勢中蘊(yùn)含的代謝信息，篩選出關(guān)鍵的影響因子即找到差

2、異顯著的特征代謝物，進(jìn)而分析這些代謝物所涉及的代謝通路和對肝癌的診斷價值，將有利于更加全面深入的了解肝癌疾病，為臨床診療開辟新的視野。
　　 方法：選取2011年3月至2012年6月在天津市第三中心醫(yī)院肝膽外科進(jìn)行根治性手術(shù)切除的15例HBV相關(guān)性HCC患者手術(shù)前后血清，其中術(shù)前血清為納入標(biāo)準(zhǔn)的HCC患者入院伊始未經(jīng)治療的清晨空腹血清標(biāo)本，術(shù)后血清為該患者進(jìn)行根治性手術(shù)后7天清晨空腹血清標(biāo)本。納入標(biāo)準(zhǔn)的肝細(xì)胞肝癌患者按照巴塞羅那

3、臨床分期均為StageA1期，其中男性8例，女性7例。利用UPLC-MS平臺分析15例HCC患者手術(shù)前后和25例健康志愿者的血清樣本，利用MZmine2.0軟件對得到的數(shù)據(jù)進(jìn)行前處理，再將處理所得數(shù)據(jù)導(dǎo)入到SIMCA-P+12.0.1.0(瑞典Umetrics公司)進(jìn)行分析。通過SIMCA-P+12.0.1.0的模式識別方法構(gòu)建正交偏最小二乘判別分析(OPLS-DA)模型，根據(jù)VIP值及VIP置信區(qū)間進(jìn)行代謝標(biāo)志物的初步篩選，然后利用S

4、PSS17.0（美國SPSS公司）對所得變量進(jìn)行配對樣本非參數(shù)檢驗(yàn)，排除P值大于0.05的變量進(jìn)而篩選出潛在代謝標(biāo)志物，并對差異性代謝物的變化趨勢及其臨床應(yīng)用價值進(jìn)行分析和探討。
　　 結(jié)果：(1)基于肝癌患者手術(shù)前后血清代謝物建立的OPLS-DA模型，該模型能夠很好地區(qū)分肝癌術(shù)前組、術(shù)后組和正常組。(2)從模型中篩選出了27個在肝癌手術(shù)前后血清中存在顯著差異的特征代謝離子，其中8個特征離子隨著肝癌的切除其血清中的含量趨向正常，

5、說明癌組織是影響這些特征代謝物變化的重要因素，鑒定出7個特征代謝物，分別為溶血性磷脂酰膽堿(LysoPC(16∶0))、雌二醇(Estradiol)、甘氨熊脫氧膽酸(Glycoursodeoxycholicacid)、α-生育三烯酚(Alpha-Tocotrienol)、磷脂酸(PA(16∶0e/18∶0))、油?；鈮A(Oleoylcarnitine)、L-棕櫚酰肉堿（L-Palmitoylcarnitine）。統(tǒng)計(jì)學(xué)分析及ROC曲線

6、表明這些差異代謝物與肝癌在患者機(jī)體中的存在與否呈高度的相關(guān)性，對肝癌疾病的深入分析與研究具有潛在的臨床價值。
　　 結(jié)論：本研究通過對肝細(xì)胞肝癌患者根治性手術(shù)切除前后代謝輪廓的研究，發(fā)現(xiàn)了溶血性磷脂酰膽堿、雌二醇、甘氨熊脫氧膽酸、α-生育三烯酚、磷脂酸、油酰基肉堿、L-棕櫚酰肉堿這7種與肝細(xì)胞肝癌有密切聯(lián)系的差異代謝物，這些差異代謝物在肝癌的診斷、預(yù)后及復(fù)發(fā)等方面具有潛在的利用價值，從內(nèi)源性代謝物及代謝途徑層面對肝癌疾病進(jìn)行研究