二羥異黃酮對細胞周期的影響及與雌激素作用的比較.pdf

1、大豆異黃酮是大豆生長過程中形成的一類次生代謝產物，具有多酚結構的混合物，它們結構與動物雌激素相似，屬于植物雌激素，能夠與動物雌激素受體(ER)結合，當體內雌激素水平較低時可以表現出雌激素活性；而當異黃酮濃度較高時則表現為抗雌激素活性，具有雙向調節(jié)平衡功能。 實驗目的：比較二羥異黃酮分別作用于雌激素受體陽性和陰性的乳腺癌細胞后，細胞周期的變化及其可能機制，從而驗證二羥異黃酮獨立于雌激素受體發(fā)揮作用的可能性。 實驗方法：以雌

2、激素受體陽性的MCF-7乳腺癌細胞為研究對象，采用RT-PCR方法檢測二羥異黃酮終濃度分別為0，5，10，20，40μmol/L作用24h后，細胞周期素cyclinE1、細胞周期素依賴性激酶cdk2和抑癌基因p21mRNA表達的變化，探討二羥異黃酮對雌激素受體陽性細胞細胞周期素和抑癌基因的影響；應用終濃度為100μmol/L的雌二醇和10μmol/L的二羥異黃酮分別作用于雌激素受體陰性的MM231細胞，采用流式細胞術(FCM)檢測細胞周

3、期的變化，MTT法檢測細胞增殖活性，從而探討其對細胞的增殖及周期的作用，并通過細胞形態(tài)學觀察與Giemsa染色法檢測驗證其促進細胞凋亡的作用。 實驗結果：與二羥異黃酮終濃度為0時的陰性對照組比較，當二羥異黃酮終濃度為10，20，40μmol/L時，cyclinE1表達水平下降(P＜0.05)；cdk2表達水平下降(P＜0.05)；p21表達水平上調(P＜0.05)；與陰性對照組比較，二羥異黃酮終濃度為5μmo1/L時，cycli

4、nE1、cdk2和p21表達差異均不明顯(P＞0.05)。 終濃度為100μmol/L的雌二醇和10μmol/L的二羥異黃酮都能使MM231細胞G2/M期阻滯，并能抑制MM231細胞生長，促使其凋亡，雌二醇作用效果更明顯。 結論：二羥異黃酮誘導雌激素受體陽性細胞MCF-7細胞凋亡很可能是通過p21-cyclinE1/CDK2信號通路發(fā)揮作用的，并且這種誘導是劑量依賴性的。 雌二醇和二羥異黃酮在一定濃度情況下，也對