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1、大豆中的異黃酮97%以上以配糖體苷形式存在。大豆異黃酮糖苷酶可水解大豆異黃酮的糖基使其生成苷元,從而提高大豆異黃酮的生物活性。本文主要研究產(chǎn)大豆異黃酮糖苷酶的發(fā)酵條件,大豆異黃酮糖苷酶的性質(zhì),酶解條件以及大豆異黃酮糖苷酶轉(zhuǎn)化前后的雌激素活性。
從四種微生物菌中篩選得到了大豆異黃酮糖苷酶高效產(chǎn)酶菌株Absidia sp.R,采用正交實(shí)驗(yàn)法確定了該菌發(fā)酵產(chǎn)酶培養(yǎng)基為:麥芽汁6°,誘導(dǎo)物為槐花,濃度為1.0%,蛋白胨0.2%,(
2、NH4)2SO40.1%,KH2PO40.2%,吐溫-80,0.5g/L。用飽和度為65%的硫銨沉淀粗酶液,酶液經(jīng)DEAE-Cellulose DE52陰離子交換柱進(jìn)行分離純化,提純后的大豆異黃酮糖苷酶經(jīng)聚丙烯酰胺凝膠電泳測(cè)得分子量為51kDa。該酶的性質(zhì)如下:酶溫度穩(wěn)定的范圍為30℃~50℃,酶的pH值穩(wěn)定范圍為4.0~7.0。酶解條件為:酶最佳反應(yīng)時(shí)間為80min,酶反應(yīng)最佳溫度為40℃,最佳pH值為5.0最佳底物濃度為1.5%。<
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