鈉-碘轉(zhuǎn)運體的基因調(diào)控及單克隆抗體的制備與應(yīng)用.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的:(1)探討抗人鈉磺轉(zhuǎn)運體(NIS)單克隆抗體的制備方法與臨床實用價值.(2)研究細胞因子對甲狀腺濾泡細胞膜上鈉/磺轉(zhuǎn)運體(NIS)基因表達的影響,闡明其在甲狀腺生理功能調(diào)控和甲狀腺疾病發(fā)病機制中的作用和地位.方法:(1)以人NIS蛋白質(zhì)的兩個片段(第2膜外段和第14f段)為抗原免疫小鼠,運用雜交瘤技術(shù),制備鼠抗人NIS單克隆抗體(rhNIS MAb),采用小鼠Ig亞類測定試劑條測定單抗的亞類,并通過ELISA、Western-bl

2、ot、免疫組化染色等方法鑒定其特異性.(2)以制備的單抗為一抗,運用免疫組化染色技術(shù)研究不同甲狀腺組織NIS抗原表達的差異.(3)采用單層細胞培養(yǎng)及半定量逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)技術(shù)檢測腫瘤壞死因子-α(TNF-α)、白細胞介素-6(IL-6)和干擾素-γ(TNF-γ)對人NIS mRNA表達的影響.結(jié)論:(1)該研究成功地制備出抗人NIS單克隆抗體,為NIS抗原-抗體的深入研究奠定了基礎(chǔ).此單克隆抗體對甲狀腺疾病的基礎(chǔ)和臨床

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