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文檔簡介
1、目的:熱休克蛋白(heat shock proteins,HSPs)是生物體在不良因素作用下所產(chǎn)生的一組具有高度保守性的應(yīng)激性蛋白。根據(jù)相對分子量的大小和氨基酸序列的同源性,主要的HSP被分成6個家族:大分子量HSP家族、HSP90家族、HSP70家族、HSP60家族、小分子量HSP(sHSP)家族和泛素。sHSP是一個極富多樣性的家族,不同種屬生物體有不同的種類,分子量在15-30kD,通常定義為具有α-晶體蛋白功能區(qū)的蛋白質(zhì)。人類熱
2、休克蛋白與α-晶狀體蛋白同源,對各種變性劑包括加熱、紫外線照射和化學處理等造成的蛋白質(zhì)非特異性的凝聚具有一定作用,這種活性被稱為伴娘活性。哺乳動物的晶狀體在相當長的時間內(nèi)保持透明,說明晶狀體蛋白質(zhì)的分子結(jié)構(gòu)受到免于分解的保護,而HSPs就執(zhí)行著維持天然蛋白質(zhì)構(gòu)型的功能。研究發(fā)現(xiàn),晶狀體無血管及神經(jīng)供給,其獨特的解剖結(jié)構(gòu)使其易遭受各種刺激因子的損害,隨著年齡的增長或在紫外線長期照射下,α-晶狀體蛋白與人類熱休克蛋白的分子伴侶作用顯著下降,
3、使一些對維持晶狀體蛋白的代謝及具有抗氧化作用的酶類活性喪失,進而造成晶狀體代謝障礙,晶狀體蛋白的三級結(jié)構(gòu)發(fā)生改變,蛋白之間凝聚形成高分子量聚集物,使晶狀體透明度下降,導致白內(nèi)障的發(fā)生。隨著年齡的增長或者氧化損傷等外界因素刺激下均可以誘導HSP70、HSP27的表達。本課題觀察HSP70與HSP27在先天性白內(nèi)障、老年性皮質(zhì)性白內(nèi)障及外傷性白內(nèi)障晶狀體上皮細胞(lens epithelial cells,LECs)中的表達情況,從而探索基
4、表達在白內(nèi)障發(fā)生過程中的意義。 方法:采用Envision免疫組織化學染色,檢測各組中晶狀體上皮細胞中HSP70、HSP27的表達,先天性白內(nèi)障的晶狀體10例,老年性皮質(zhì)性白內(nèi)障晶狀體20例,外傷性白內(nèi)障的晶體12例,對照組正常人帶有前囊膜的晶狀體6例,并進行陽性細胞計數(shù)及陽性表達區(qū)域的積分光密度值(integral optical density,IOD)計算。 結(jié)論:HSP70及HSP27可能在先天性白內(nèi)障、老年性皮
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