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文檔簡介
1、目的：該研究收集年齡相關性白內(nèi)障與正常晶狀體的囊膜標本,利用改良的消減雜交法為工具,構建人年齡相關性白內(nèi)障與正常晶狀體上皮細胞的差異表達cDNA文庫,篩選年齡相關性白內(nèi)障與正常晶狀體上皮的差異表達基因,并驗證部分基因的功能,以篩選年齡相關性白內(nèi)障的致病相關基因,為研究白內(nèi)障發(fā)病機理,防治白內(nèi)障提供新思路.結(jié)論:(1)用改良的消減雜交法結(jié)合選擇性PCR法可以從少量標本中快速有效地構建差異表達cDNA文庫,且文庫的質(zhì)量較高,大片段比例較高.
2、(2)該研究成功構建了年齡相關性白內(nèi)障與正常晶狀體上皮的差異表達cDNA文庫,文庫約含4000個克隆,經(jīng)酶切鑒定其中大片斷比例較高.(3)經(jīng)用Southern點雜交法可以從消減cDNA文庫中一次性快速篩選大量候選基因片斷.(4)所建的年齡相關性白內(nèi)障與正常晶狀體上皮的差異表達cDNA文庫中,成功篩出三個新基因,對這些基因的分析表明,其均有開放讀框,編碼的蛋白質(zhì)與已知蛋白的同源性均>25﹪,可以認為其為保守基因.(5)死亡因子相關基因15
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