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文檔簡(jiǎn)介
1、目的探討CIT作為fascin調(diào)控膽管癌發(fā)生發(fā)展的下游基因,其與膽管癌增殖功能的關(guān)系。
方法 RT-PCR對(duì)CIT基因在臨床樣本組織中的表達(dá)進(jìn)行檢測(cè);慢病毒的制備及轉(zhuǎn)染,將目的細(xì)胞分為感染過(guò)陰性對(duì)照病毒的膽管癌RBE細(xì)胞組與感染加RNAi靶點(diǎn)病毒的膽管癌RBE細(xì)胞組,RT-PCR檢測(cè)CIT基因在mRNA水平的敲檢效率;分別對(duì)轉(zhuǎn)染靶細(xì)胞與陰性對(duì)照細(xì)胞進(jìn)行增殖細(xì)胞計(jì)數(shù)并分析有無(wú)差異,確定CIT基因?qū)?xì)胞增殖功能的影響。
2、結(jié)果
1、RT-PCR檢測(cè)10臨床新鮮膽管癌組織及其癌旁組織發(fā)現(xiàn),CIT在癌組織中表達(dá)較癌旁組織高;
2、慢病毒制備并轉(zhuǎn)染RBE細(xì)胞成功,RT-PCR對(duì)mRNA水平的CIT基因進(jìn)行敲檢,結(jié)果提示實(shí)驗(yàn)組RBE細(xì)胞中CIT基因在mRNA水平的表達(dá)量受到抑制,p值為3.60085E-03,p<0.05,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,基因敲檢成功;
3、RT-PCR檢測(cè)發(fā)現(xiàn),轉(zhuǎn)染靶細(xì)胞相比陰性對(duì)照組細(xì)胞,細(xì)胞增殖顯著減緩,增殖抑制
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