CDKs對人肝癌細(xì)胞SMMC7721的影響.pdf

1、目的: 探討細(xì)胞周期蛋白依賴激酶（cyclin dependent kinases，CDKs）對原發(fā)性肝癌（肝癌）細(xì)胞生長、增殖、細(xì)胞周期時相分布、凋亡的影響及可能的作用機制。 方法: 對體外培養(yǎng)的肝癌細(xì)胞株SMMC-7721分別予濃度為0μ mol/L、2μ mol/L、4μ mol/L、8μ mol/L、16μ mol/L、32μ mol/L CDKs抑制劑Roscovitine干預(yù)72 h，分別通過倒置顯微

2、鏡、四甲基偶氮唑藍(lán)法、流式細(xì)胞儀、逆轉(zhuǎn)錄PCR法觀察SMMC-7721細(xì)胞的生長、增殖，細(xì)胞周期時相的分布、凋亡以及CDK2、Caspase-3和BCL-2 mRNA的表達(dá)。 結(jié)果: Roscovitine干預(yù)72 h后，光鏡下可見隨著Roscovitine濃度的增加，部分細(xì)胞核固縮、胞體折光性減弱、胞漿內(nèi)可見有顆粒和核碎片形成，其中以32μmol/L組的改變最為明顯。四甲基偶氮唑藍(lán)法結(jié)果顯示，不同濃度的Roscovi

3、tine對細(xì)胞生長均有一定的抑制作用，Roscovitine對細(xì)胞的抑制作用呈劑量依賴性和時間依賴性。流式細(xì)胞儀檢測發(fā)現(xiàn)，經(jīng)Roscovitine干預(yù)后肝癌細(xì)胞G0期、G1期及凋亡細(xì)胞的比例增加。逆轉(zhuǎn)錄PCR發(fā)現(xiàn)，隨著Roscovitine濃度的增加，CDK2 mRNA及凋亡相關(guān)基因BCL-2 mRNA水平降低，Caspase-3 mRNA表達(dá)升高。 結(jié)論: CDKs表達(dá)降低可抑制增殖期肝癌細(xì)胞的生長、增殖，改變肝癌細(xì)