大豆黃酮和酸性肽對人肝癌SMMC7721細胞增殖及腫瘤干細胞CD133表達的影響.pdf

1、背景和目的：
　　 肝癌是臨床上最常的見惡性腫瘤之一。其死亡率在消化系統(tǒng)惡性腫瘤中列第3位。我國是世界上肝癌發(fā)病比較集中的國家，每年新發(fā)病例數(shù)約占全球的.45％。由于肝癌惡性程度高，發(fā)展迅速，治療困難，病死率高，始終是我國醫(yī)學界研究的重大課題。
　　 目前對肝癌的治療方法主要有手術(shù)、放療、化療及生物治療等手段，但總體治療效果尚不理想。腫瘤干細胞的發(fā)現(xiàn)使人們對腫瘤有了新的認識。人們認識到腫瘤起源于腫瘤干細胞。腫瘤的形成是腫

2、瘤中的腫瘤干細胞增殖的結(jié)果。這些細胞雖然在腫瘤組織中的數(shù)量非常少，只占腫瘤組織中細胞總數(shù)的1％，但他們具有耐藥性和不斷增殖為腫瘤組織的能力。因此，只有消滅這些細胞才可能徹底治愈腫瘤。
　　 腫瘤干細胞最早在血液病急性髓細胞性白血病中被發(fā)現(xiàn)，其細胞表面存在著特異性的標志物。隨后在乳腺癌，腦腫瘤，前列腺癌以及肺癌組織中也相繼發(fā)現(xiàn)了腫瘤干細胞。腫瘤干細胞表面存在著多種腫瘤標記物。其中應用最廣泛的是CD133。一些報道顯示，CD133陽

3、性的細胞與腫瘤的發(fā)生發(fā)展，浸潤轉(zhuǎn)移和耐藥性的產(chǎn)生都有密切的關(guān)系。腫瘤干細胞不僅存在于腫瘤組織中，也存在于體外培養(yǎng)的腫瘤細胞系中。
　　 已糖激酶是一種磷酸化己糖特別是葡萄糖的酶。而葡萄糖是大多數(shù)組織和器官通過糖代謝獲得能量的主要物質(zhì)。葡萄糖經(jīng)磷酸化生成6-磷酸葡萄糖，這是糖代謝的第一步。堿性磷酸酶是一種催化核酸、蛋白等分子去除磷酸基團的酶。己糖激酶和堿性磷酸酶的活性反映著細胞的代謝能力。在腫瘤細胞中，己糖激酶和堿性磷酸酶的活性通

4、常都是高的。
　　 大豆黃酮和酸性肽具有抑制肝癌細胞增殖的作用，但是否抑制腫瘤干細胞中CD133的表達，尚未見報導。故此，本實驗對大豆黃酮和酸性肽對腫瘤細胞增殖和腫瘤干細胞CD133的表達影響做了初步探討。
　　 材料及方法：
　　 1．人肝癌SMMC7721細胞培養(yǎng)，以獲得對數(shù)生長期的細胞。
　　 2．將大豆黃酮和酸性肽配置成100μg/ml、200μg/ml、300μg/ml、400μg/ml和500

5、ug/ml濃度，并處理對數(shù)生長期的細胞24小時，48小時和72小時，并采用MTT法測定細胞的成活率，并繪制細胞生長曲線。
　　 3．大豆黃酮和酸性肽分別處理對數(shù)生長期的人肝癌SMMC7721細胞，用試劑盒法測定人肝癌SMMC7721細胞中的己糖激酶和堿性磷酸酶的活性。
　　 4．大豆黃酮和酸性肽分別處理對數(shù)生長期的人肝癌SMMC7721細胞，用Western Blotting方法檢測CD133的表達水平。
　　

6、結(jié)果：
　　 1．用大豆黃酮和酸性肽處理人肝癌SMMC7721細胞，均對其增殖具有抑制作用，并且抑制作用與濃度密切相關(guān)。
　　 2．用大豆黃酮和酸性肽處理人肝癌SMMC7721細胞，均抑制人肝癌SMMC7721細胞中的己糖激酶和堿性磷酸酶的活性．
　　 3．Western Blot檢測結(jié)果顯示，大豆黃酮和酸性肽可降低人肝癌腫瘤干細胞中CD133的表達。
　　 結(jié)論：
　　 1．在實驗濃度上，大豆黃