靈芝多糖降血糖作用及其機(jī)理的研究.pdf

1、隨著人們生活水平的不斷提高,糖尿病的患病人數(shù)也與日俱增。由于糖尿病的高血糖引起的糖尿病并發(fā)癥和心血管疾病嚴(yán)重著危害人類的健康。靈芝多糖是中國(guó)傳統(tǒng)醫(yī)藥?kù)`芝中最重要的活性物質(zhì)之一,已有多篇關(guān)于靈芝多糖降血糖的研究。但其相關(guān)機(jī)理的報(bào)道卻較少。本論文通過(guò)提取得到的靈芝多糖(Ganoderma lucidum polysaccharides,GI-PS),干預(yù)鏈脲佐菌素(Streptozotocin,STZ)誘導(dǎo)的糖尿病大鼠,以鹽酸二甲基雙胍為陽(yáng)

2、性對(duì)照,研究GI-PS對(duì)胰腺組織的保護(hù)和抑制胰腺β細(xì)胞凋亡來(lái)研究GI-PS降血糖的機(jī)理。
　　 本次實(shí)驗(yàn)利用傳統(tǒng)熱水提取法從靈芝子實(shí)體中提取得到靈芝粗多糖,利用微濾膜技術(shù)提純得到GI-PS(與企業(yè)合作購(gòu)買得到)。HPLC-GPC研究顯示,GI-PS平均分子量為8849Da,紫外光譜測(cè)定顯示GI-PS可能存在少量的蛋白質(zhì),而氨基酸分析和蛋白質(zhì)含量測(cè)定進(jìn)一步證實(shí)GI-PS存在少量的蛋白質(zhì),推斷GI-PS為肽多糖復(fù)合物。GI-PS單糖

3、組成比例為:葡糖糖:半乳糖:阿拉伯糖:甘露糖=22.4:1.9:1.0:2.1.紅外光譜研究顯示GI-PS結(jié)構(gòu)中有β-糖苷鍵,從結(jié)構(gòu)上推斷可能有一定的藥理活性。
　　 通過(guò)對(duì)GI-PS的體外抗氧化性研究發(fā)現(xiàn),GI-PS具有清除DPPH自由基的能力,其能力約相當(dāng)于Vc的5％。用其它抗氧化性測(cè)定方法發(fā)現(xiàn),GI-PS同樣也具有一定的清除超氧自由基、羥基自由基離子和還原能力,這證明了GI-PS存在一定的抗氧化性。
　　 為了研究

4、GI-PS降血糖機(jī)理,開展了動(dòng)物實(shí)驗(yàn)。給50只雄性SD大鼠(250±30 g,9周)單次注射65mg/kg的STZ。注射STZ72h后,尾部取血測(cè)定空腹血糖,取空腹血糖水平≥250mg/dl(13.9mmol/L),并伴有多尿和其它糖尿病的癥狀的大鼠作為糖尿病模型大鼠。將造模的成功的大鼠分為3組:D,M和G組(n=10),未經(jīng)造模的大鼠(n=10)作為C組對(duì)照組。所有大鼠每天灌胃同體積溶液,具體如下:D組和C組大鼠灌胃生理鹽水,M組大鼠

5、灌胃100mg/kg/bt鹽酸二甲基雙胍(溶于生理鹽水),G組灌胃200mg/kg/bt GI-PS(溶于生理鹽水)。實(shí)驗(yàn)持續(xù)八周。
　　 實(shí)驗(yàn)結(jié)束后發(fā)現(xiàn),G組和M組大鼠血漿中空腹血糖、甘油三酯(Triacylglycerol,TG)、低密度脂蛋白(Low-density lipoproteiri cholesterol,LDL-C)、一氧化氮(Nitric oxide,NO)、血尿素氮(Blood urea nitrogen,

6、BUN)和肌酐(Creatinine,Cr)的濃度(P＜0.05)顯著低于D組大鼠,而高密度脂蛋白膽固醇(High-density lipoprotein cholesterol,HDL-C)濃度(P＜0.05)要顯著高于D組大鼠;同時(shí)還發(fā)現(xiàn)M組和G組大鼠尿液中尿糖和尿蛋白的含量顯著低于D組。通過(guò)對(duì)大鼠胰腺和腎臟組織切片發(fā)現(xiàn),GI-PS和鹽酸二甲基雙胍可以改善由于STZ導(dǎo)致的胰腺和腎臟組織的病變。通過(guò)測(cè)定腎臟和胰腺組織內(nèi)酶促抗氧化劑的含

7、量發(fā)現(xiàn),M組和G組腎臟和胰腺組織內(nèi)超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)、過(guò)氧化氫酶(Catalase,CAT)和谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(Glutathione peroxidase,GPx)含量顯著高于D組(P＜0.05)。通過(guò)對(duì)胰腺組織內(nèi)凋亡基因的相關(guān)表達(dá)發(fā)現(xiàn),M組和G組胰腺組織內(nèi)B細(xì)胞淋巴瘤/白血病-2基因(B cell lymphoma-Leukemia-2,bcl-2)、誘導(dǎo)型一氧化氮合成酶(Induc

8、ible nitric oxide synthase,iNOS)和胰腺十二指腸同源盒因子1(Pancreatic duodenal homeobox factor-1,PDX-1)的mRNA表達(dá)要顯著低于D組,而Bcl-2結(jié)合X蛋白(Bcl-2-associated X protein,bax)和casp-3的mRNA表達(dá)水平要顯著高于D組(P＜0.05)。
　　 結(jié)論:實(shí)驗(yàn)中提取的分子量為8849Da的GI-PS同樣具有降低S