轉(zhuǎn)基因CTLA4-Ig誘導(dǎo)大鼠肝移植免疫耐受的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：通過建立大鼠原位肝移植模型，探討CTLA4-Ig抗排斥反應(yīng)和誘導(dǎo)免疫耐受的作用。 方法：采用近交系雌性DA大鼠作供體、雌性LEW大鼠作受體，“二袖套法”建立肝臟移植模型20例。術(shù)前隨機(jī)分為2組：A組即排斥組(DA→LEW，n=10)，只進(jìn)行原位肝移植；B組即CTLA4-Ig基因治療組(DA→LEW，n=10)，在供肝冷保存時(shí)，將CTLA4-Ig基因?qū)氪笫笠浦哺?。A、B兩組受體分別于術(shù)后3、7、16d經(jīng)眼球取血獲得血清標(biāo)本

2、。術(shù)后7d各組隨即處死2例，收集肝臟標(biāo)本。血清標(biāo)本檢測(cè)IL-2、ALT、AST、TBIL的濃度。肝臟標(biāo)本觀察移植物病理學(xué)變化。 結(jié)果：成功建立了大鼠原位肝移植模型。DA→LEW近交系大鼠肝移植后移植排斥反應(yīng)強(qiáng)烈，在不使用免疫抑制劑的情況下，生存時(shí)間<14天，是進(jìn)行肝移植免疫研究的可靠模型。術(shù)前大鼠血清IL-2濃度362.31±49.26 ng/L。肝移植術(shù)后，IL-2的濃度在A組中升高到較高水平，而在B組中則維持一個(gè)較低的水平。

3、術(shù)后3、7d，A組與B組血清IL-2的濃度存在非常顯著的差異。術(shù)前、術(shù)后3d，A組與B組ALT、AST、TBIL之間無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異；術(shù)后7d，A組濃度明顯高于B組(P<0.05)。A組與B組，在術(shù)后7d行移植肝取材，病理學(xué)證實(shí)：A組移植肝發(fā)生嚴(yán)重的細(xì)胞性排斥，B組可見移植肝組織損傷程度輕。 結(jié)論：在DA→LEW大鼠原位肝移植的基礎(chǔ)上，于供肝冷保存時(shí)應(yīng)用腺病毒載體介導(dǎo)CTLA4-Ig基因轉(zhuǎn)染供肝，可以抑制同種異體免疫反應(yīng)，在不使用常