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1、目的:明確Ghrelin對(duì)海人酸(Kainic acid,KA)致癇大鼠海馬神經(jīng)元的影響。檢測(cè)其影響與海馬內(nèi)γ-氨基丁酸(gamma-aminobutyric,GABA)表達(dá)變化的相關(guān)性,以初步探討其影響的作用機(jī)制。
方法:雄性SD大鼠隨機(jī)分為空白對(duì)照組、手術(shù)對(duì)照組、海人酸組(KA)和海人酸+Ghrelin組(KG)。KA組及KG組以注射海人酸為時(shí)間基點(diǎn)分為注射后3、6、12、24h四個(gè)時(shí)間點(diǎn)亞組。立體定向下將注藥管置入大鼠海
2、馬,將電極置入額葉皮層。將海人酸經(jīng)微量泵注入海馬,建立海人酸致癇模型。KG組行Ghrelin腹腔注射。觀察大鼠行為學(xué)變化,監(jiān)測(cè)腦電圖,HE染色及尼氏染色觀察海馬神經(jīng)元變化情況,免疫熒光檢測(cè)海馬內(nèi)γ-氨基丁酸表達(dá)的影響。
結(jié)果:海人酸注射后,經(jīng)過(guò)潛伏期后大鼠開(kāi)始出現(xiàn)癲癇發(fā)作,KG組潛伏期(12.3±3.5min)較KA組潛伏期(8.7±1.2min)明顯延長(zhǎng)(P<0.05)。KG組大鼠強(qiáng)直陣攣持續(xù)時(shí)間(10.8±1.4min)明
3、顯低于KA組(15.2±2.7min)(P<0.05)。HE染色及尼氏染色顯示癲癇大鼠海馬神經(jīng)細(xì)胞形態(tài)學(xué)變化明顯、神經(jīng)元缺失嚴(yán)重,統(tǒng)計(jì)分析示KG組各時(shí)間點(diǎn)神經(jīng)細(xì)胞凋亡、缺失情況較KA組減輕(P<0.05)。免疫熒光檢測(cè)統(tǒng)計(jì)結(jié)果示注射海人酸后大鼠海馬組織24小時(shí)內(nèi)γ-氨基丁酸能神經(jīng)元數(shù)量與空白對(duì)照組和手術(shù)對(duì)照組相比隨時(shí)間延長(zhǎng)而持續(xù)減少,KG組各個(gè)時(shí)間點(diǎn)海馬內(nèi)的GABA能神經(jīng)元數(shù)量位于空白對(duì)照組與KA組之間,GABA能神經(jīng)元減少趨勢(shì)更為平緩
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