IRAK1在癲癇患者及大鼠癲癇模型海馬中的表達(dá)及抑制IRAK1對(duì)癲癇大鼠癇性發(fā)作的影響.pdf

1、 目的：(1) 了解IRAK1在難治性顳葉癲癇患者腦組織中的表達(dá)；(2)了解IRAK1在氯化鋰-匹羅卡品誘導(dǎo)的顳葉癲癇模型大鼠海馬中的表達(dá)；(3)觀察抑制IRAK1對(duì)氯化鋰-匹羅卡品誘導(dǎo)的SE模型癲癇模型大鼠癇性發(fā)作的影響。方法：(1)從課題組先前收集的難治性顳葉癲癇患者手術(shù)切除的顳葉腦組織標(biāo)本中隨機(jī)抽取20例作為病例組,收集顱腦外傷后減壓手術(shù)中正常的顳葉腦組織標(biāo)本作為對(duì)照組。采用蛋白免疫印跡(Western blot)方法檢測(cè)IRA

2、K1在顳葉癲癇患者腦組織中的表達(dá)；(2)72只SD雄性大鼠隨機(jī)分成8組,其中7組腹腔注射氯化鋰-匹羅卡品為模型組,另外一組腹腔注射生理鹽水為對(duì)照組。模型組大鼠腹腔注射氯化鋰,18-24小時(shí)后注射匹羅卡品誘導(dǎo)癲癇持續(xù)狀態(tài)(status epilepticus,SE),選取 SE 后 6h、1d、3d、7d、14d、30d、60d的顳葉腦組織為研究對(duì)象,與對(duì)照組進(jìn)行比較。使用免疫組化、免疫熒光和免疫印跡的方法檢測(cè)IRAK1在大鼠顳葉癲癇模型

3、中的表達(dá)及變化規(guī)律；(3)用氯化鋰-匹羅卡品誘導(dǎo)大鼠SE模型,點(diǎn)燃后10min給予IRAK1/4 抑制劑(IRAK1/4 inhibitor)腹腔注射進(jìn)行干預(yù),連續(xù)給藥 3 天,設(shè)置干預(yù)組、模型對(duì)照組、DMSO 溶劑對(duì)照組,觀察三組大鼠癇性發(fā)作情況。結(jié)果：(1)難治性顳葉癲癇患者腦組織中 IRAK1 表達(dá)水平比正常對(duì)照組明顯增高(P<0.05)；(2) LiCl-PILO誘導(dǎo)的顳葉癲癇模型大鼠海馬組織中,IRAK1主要在神經(jīng)元中表達(dá),與

4、對(duì)照組比較,IRAK1在SE后3d、7d表達(dá)有明顯增高, IRAK1的表達(dá)呈動(dòng)態(tài)變化,總體趨勢(shì)是逐漸增高,在60天觀察期內(nèi), IRAK1 的表達(dá)在 60 天時(shí)間點(diǎn)達(dá)峰值。方差分析顯示各時(shí)間點(diǎn)與對(duì)照 組比較,IRAK1表達(dá)增高,具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；(3)IRAK1/4抑制劑干預(yù)組與模型組比較,干預(yù)組癇性發(fā)作級(jí)別降低(P<0.05),癇性發(fā)作次數(shù)顯著減少(P<0.05)；模型組與溶劑對(duì)照組比較,癇性發(fā)作級(jí)別及次數(shù)無差異(P>0.