基于脂質(zhì)體包封血紅蛋白構(gòu)建人工紅細(xì)胞的工藝研究及其評(píng)價(jià).pdf

1、全世界范圍內(nèi)血源緊張、病毒污染等問題推動(dòng)了血液代用品的研究。輸血來源有限，且輸注后可能引起嚴(yán)重的不良反應(yīng)，因而國(guó)內(nèi)外科學(xué)家對(duì)以攜氧液作為輸血替代品進(jìn)行了長(zhǎng)達(dá)一個(gè)多世紀(jì)的探索。迄今為止，幾種第一代紅細(xì)胞代用品已經(jīng)有望獲準(zhǔn)上市。各種產(chǎn)品有其獨(dú)自的生理特性、生物活性和副作用。本研究主要從脂質(zhì)體包封血紅蛋白（liposome encapsulated hemoglobin，LEH）的角度出發(fā)，作為氧治療劑進(jìn)行研發(fā)，可能成為今后紅細(xì)胞代用品研制的

2、發(fā)展方向。
　　關(guān)于本研究：
　　目的：確定有效制備及鑒定微囊包被血紅蛋白和微米級(jí)人工紅細(xì)胞的方法。
　　方法：首先通過低滲法制備高純度、高濃度的膜蛋白，然后根據(jù)界面縮聚法的原理,利用勻速微囊制備噴頭,將含有2,3-DPG、膜蛋白和血紅蛋白水相直接滴入到含磷脂的植物油中，通過高速攪拌使囊心物(2,3-DPG與血紅蛋白單體、二聚體構(gòu)建的不穩(wěn)定的四聚體)的周圍形成單個(gè)球狀膜殼型微囊。
　　結(jié)果：微囊包被血紅蛋白其微囊

3、呈球狀，表面光滑均勻，微囊直徑2-5μm(電子顯微鏡下估算值)。人工紅細(xì)胞透射電鏡：?jiǎn)蝹€(gè)包囊顆粒呈圓球狀，有的表面光滑，有的表面稍有凹凸,平均粒徑為3μm，最小粒徑為1μm；掃描電鏡顯示:顆粒內(nèi)部電子密度較高、不均勻,呈纖維狀和細(xì)顆粒狀交錯(cuò)分布,是為血紅蛋白。人工紅細(xì)胞的包埋率為53％，泄漏率在4℃生理鹽水中15d釋放40.9%。
　　結(jié)論：雙相乳化法可制備微米級(jí)人工紅細(xì)胞,且具有攜帶和釋放氧氣及二氧化碳的生物活性。
　　各