陣發(fā)性睡眠性血紅蛋白尿癥患者骨髓CD34+CD59+與CD34+CD59-細胞膜G-CSF、SCF受體表達及受體后STAT5磷酸化水平研究.pdf

1、目的：
　　檢測陣發(fā)性睡眠性血紅蛋白尿癥(PNH)患者骨髓CD34+CD59+和CD34+CD59-細胞粒細胞集落刺激因子受體(G-CSFR、CD114)、干細胞生長因子受體(C-KIT、CD117)和胞漿內(nèi)受體后信號通路蛋白STAT5表達水平及G-CSF或SCF體外刺激前后STAT5磷酸化(P-STAT5)表達差異，評價PNH患者骨髓CD34+CD59+和CD34+CD59-造血干細胞膜因子受體功能狀態(tài)及對細胞因子刺激的反應。<

2、br>　　方法：
　　1.應用流式細胞術(shù)檢測26例PNH患者和14名正常對照者骨髓CD34+CD59+和CD34+CD59-細胞膜CD114、CD117及胞漿內(nèi)STAT5蛋白的表達情況。
　　2.26例PNH患者和14名正常對照者骨髓單個核細胞(BMMNC)經(jīng)和不經(jīng)100ng/mlG-CSF、100ng/mlSCF刺激，應用流式細胞術(shù)分別檢測CD34+CD59+和CD34+CD59-細胞P-STAT5平均熒光強度(MFI)(

3、單位：道數(shù))。
　　結(jié)果：
　　1.①PNH患者骨髓CD34+CD59-細胞CD114表達率(43.23±19.77)％，明顯低于CD34+CD59+細胞(73.72±17.42)％(P<0.01)和正常對照組CD34+CD59+細胞(65.91±13.70)％(P<0.01)；而PNH患者CD34+CD59+細胞與正常對照組CD34+CD59+細胞CD114表達率差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。
　?、赑NH患者骨

4、髓CD34+CD59-細胞CD117表達率(49.20±26.80)％，明顯低于CD34+CD59+細胞(67.62±17.41)％(P<0.01)和正常對照組CD34+CD59+細胞(70.21±12.68)％(P<0.01)；而PNH患者CD34+CD59+細胞與正常對照組CD34+CD59+細胞CD117表達率差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。
　　2.PNH患者骨髓CD34+CD59-和CD34+CD59+細胞及正常對照組

5、CD34+CD59+細胞STAT5的MFI分別為(270.01±181.26)、(205.05±146.16)及(227.39±156.65)，三組比較差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。
　　3.①未經(jīng)細胞因子刺激組，PNH患者CD34+CD59-細胞內(nèi)P-STAT5的MFI為(23.91±18.50)，明顯低于CD34+CD59+細胞(63.72±49.48)(P<0.01)和正常對照組CD34+CD59+細胞(61.20±33

6、.34)(P<0.01)；而PNH患者CD34+CD59+細胞與正常對照組CD34+CD59+細胞P-STAT5差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。
　?、贕-CSF刺激組，PNH患者CD34+CD59-細胞P-STAT5的MFI為(36.26±35.15)，明顯低于CD34+CD59+細胞(123.61±83.53)(P<0.01)和正常對照組CD34+CD59+細胞(115.69±58.64)(P<0.01)；而PNH患者CD3

7、4+CD59+細胞與正常對照組CD34+CD59+細胞P-STAT5差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。
　?、跾CF刺激組，PNH患者CD34+CD59-細胞P-STAT5的MFI為(33.59±27.44)，明顯低于CD34+CD59+細胞(123.53±97.04)(P<0.01)和正常對照組CD34+CD59+細胞(128.04±62.29)(P<0.01)；而PNH患者CD34+CD59+細胞與正常對照組CD34+CD59

8、+細胞P-STAT5差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。
　　④G-CSF刺激后，PNH患者CD34+CD59+細胞P-STAT5的MFI較刺激前增高(59.91±47.40)，明顯超過CD34+CD59-細胞(13.17±26.46)(P<0.01)；正常對照組CD34+CD59+細胞P-STAT5的MFI較刺激前增高(54.49±51.54)，也明顯超過PNH患者CD34+CD59-細胞(13.17±26.46)(P<0.01)

9、，而與PNH患者CD34+CD59+細胞比較差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。
　?、軸CF刺激后，PNH患者CD34+CD59+細胞P-STAT5的MFI較刺激前增高(59.83±66.79)，明顯超過CD34+CD59-細胞(9.77±17.10)(P<0.01)；正常對照組CD34+CD59+細胞P-STAT5的MFI較刺激前增高(66.84±54.74)，也明顯超過PNH患者CD34+CD59-細胞(9.77±17.10)

10、(P<0.01)，而與PNH患者CD34+CD59+細胞比較差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。
　　結(jié)論：
　　1、PNH患者骨髓造血干細胞異?？寺D114、CD117表達明顯低于正?？寺?，但胞內(nèi)信號傳導蛋白(STAT5)表達正常；
　　2、PNH克隆在體外應用G-CSF、SCFN激后，STAT5磷酸化明顯低于正常造血克隆。這提示PNH克隆細胞膜CD1145和CD117數(shù)量和功能低下，利用異?？寺毎蜃臃磻缓玫?/p>