嗅質(zhì)丁香酚改善嗅覺認(rèn)知及其機(jī)制的探討.pdf

1、目的：嗅質(zhì)或氣味能通過嗅覺通路影響腦功能。通過神經(jīng)行為學(xué)觀察確定嗅質(zhì)丁香酚(EG)可以改善C57BL/6對EG的嗅覺認(rèn)知能力；在此基礎(chǔ)上研究EG干預(yù)后小鼠嗅上皮嗅覺受體(ORs)mOR-EG的基因表達(dá)變化，及通過EG干預(yù)體外嗅覺感覺神經(jīng)元(OSNs)的培養(yǎng)，對OSNs的mOR-EG的基因表達(dá)變化進(jìn)行檢測。探討嗅質(zhì)改善嗅覺認(rèn)知及其機(jī)制。 方法： EG干預(yù)小鼠從出生開始(PNDO)分別至6w和10w，對EG 6w和6w對照組

2、，EG 10w組和10w對照組。然后進(jìn)行嗅質(zhì)偏愛和嗅質(zhì)辨識實(shí)驗(yàn)，檢測小鼠對EG的嗅覺認(rèn)知的變化；通過Real-time PCR技術(shù)，比較EG 6w和6w對照組，EG 10w和10w對照組的嗅上皮mOR.EG的基因表達(dá)差異，對mOR-EG基因變化與EG的嗅覺認(rèn)知行為學(xué)之間可能的聯(lián)系進(jìn)行探討；利用OMP和TUJ-1的免疫細(xì)胞化學(xué)和RT-PCR.實(shí)驗(yàn)對體外培養(yǎng)的OSNs進(jìn)行鑒定，后利用30μm，100μm和300μm EG分別干預(yù)OSNs培養(yǎng)

3、，再通過Real-time PCR技術(shù)對各組mOR-EG的基因表達(dá)進(jìn)行檢測，對EG改善嗅覺認(rèn)知的機(jī)制進(jìn)一步探討。 結(jié)果： 1.EG 6w和6w對照組，EG 10w和10w對照組神經(jīng)行為學(xué)結(jié)果之間的比較，EG6w組對EG的嗅覺辨識時間明顯快于6w對照組，EG 10w組對EG的嗅覺辨識時間亦明顯快于6w對照組； 2.Real-time PCR技術(shù)對上述各組嗅上皮mOR-EG的基因表達(dá)差異檢測，發(fā)現(xiàn)EG 6w組的mOR

4、-EG基因表達(dá)量明顯高于6w對照組，EG 10w組的mOR-EG基因表達(dá)量明顯高于10w對照組，且EG 6w組和EG 10w組的mOR-EG基因表達(dá)量約為相應(yīng)對照組的9倍； 3.經(jīng)OMP和TUJ-1的免疫細(xì)胞化學(xué)和RT-PCR鑒定，體外培養(yǎng)的多數(shù)細(xì)胞為OSNs。EG不同濃度干預(yù)OSNs的培養(yǎng)后，Real-time PCR檢測各組mOR-EG基因表達(dá)量，發(fā)現(xiàn)30μm EG和100μG組的mOR-EG基因表達(dá)量明顯高于空白對照組，分