生長抑素類似物和胃癌細胞多藥耐藥逆轉的實驗研究.pdf

1、胃癌是消化道常見的惡性腫瘤，化療是治療胃癌的方法之一。然而，由于腫瘤的耐藥，影響了療效。腫瘤細胞接觸一種化療藥物并產生耐藥性，同時對其他多種結構和作用機制不同的化療藥物也產生耐藥性，這種現(xiàn)象稱為多藥耐藥性(multiple drug resistance，MDR)。MDR是臨床腫瘤化療失敗的主要原因之一。ATP依賴性膜轉運蛋白P-gp被證實在胃癌細胞高表達，可能是胃癌耐藥的主要原因之一。 胃癌細胞對細胞毒藥物多藥耐藥的狀況，促進

2、發(fā)展新的細胞毒藥物同時，非細胞毒藥物的研究也受到了極大的關注。大量的體內、體外實驗證實，生長抑素類似物(somatostatin analogues，SSA)對非神經內分泌腫瘤具有抗增殖活性，SSA通過與細胞表面的生長抑素受體(somatostatinreceptor，SSTR)結合起作用。迄今有5種SSTR，octreotide對SSTR<,2>，SSTR<,2>和SSTR<,5>有高親和力。本研究應用胃癌細胞系SGC-790l，檢測

3、SGC-790l細胞表面SSTR表達水平，從mRNA及蛋白質水平檢測細胞毒藥物聯(lián)合應用octreotide前后，SGC-790l細胞P-gp的表達水平的改變，探討octreotide增加細胞毒藥物化療敏感性與P-gp表達之間的關系。研究方法： 1．MTT比色法測定5-氟脲嘧啶，奧沙利鉑對SGC-790l細胞的生長抑制率，Bliss軟件計算半數(shù)抑制濃度(IC<,50>)。RT-PCR測定SGC-790l細胞MDR，SSTR<,2>

4、 mRNA的表達水平。 2SGC-790l細胞分為2組，對照組加入各種濃度的5-氟脲嘧啶，奧沙利鉑，實驗組同時加入不同濃度的octreotide(O.05ug/ml，0.1ug/ml，0.2ug/ml，0.4ug/m1)， MTT比色法測定SGC-7901細胞的生長抑制率，Bliss軟件計算IC<,50>。分別用RT-PCR，流式細胞術測定octreotide作用前后MDR<,1>mRNA，P-gP的表達水平。研究結果：

5、 1．MTT測定應用octreotide、細胞毒藥物及兩者聯(lián)合應用對SGC-7901細胞的生長抑制率及IC<,50>。中高劑量組(0.1-0.4ug/ml)．octreotide聯(lián)合2種細胞毒藥物可以顯著降低各細胞毒藥物的IC<,50>(P<0.05)，而0.05ug/ml octreotide組作用不明顯(P>0.05)。亞細胞毒性濃度的octreotide(0.05ug/ml)與各細胞毒藥物聯(lián)合應用，兩者具有協(xié)同細胞毒作用，各細胞

6、毒藥物不同的濃度水平上，聯(lián)合用藥指數(shù)均<1。各細胞毒藥物IC<,50>與octreotide濃度呈線性負相關(r=-0.949，-0.977 P<0.05)． 2．SGC-7901細胞表面有SSTR<,2>的表達。 3．在SGC-7901細胞培養(yǎng)24h后，加入不同濃度的octreotide作用24h，MDR<,1>mRNA均有不同程度的下降(P<0.05)，且octreot ide濃度越高，MDR<,1>mRNA擴增量越

7、低，呈較好的劑量依賴關系。不同濃度的octreotide作用48h，與24h相比，MDR<,1>mRNA表達沒有顯著性改變(P>O.05)。 4．不同濃度的octreotide(0.05，0.1，0.2，0.4ug/ml)作用24 h，P-gp陽性率分別為12.58％，8.88％，4.21％，3.85％：與對照細胞相比，表現(xiàn)不同程度的降低(P<0.05)，隨octreotide濃度的增加，P-gp陽性率越低，有較好的劑量依賴性。

8、對照細胞P-gp陽性率為13.88％。 結論： 1．SGC-7901細胞P-gp過表達，細胞對2種細胞毒藥物耐藥。 2．SGC-7901細胞表面有SSTR<,2>的表達，octreotide可以通過與SSTR<,2>結合發(fā)揮抗增殖作用。 3．octreotide與細胞毒藥物聯(lián)合應用可以降低各細胞毒藥物的 IC<,50>具有協(xié)同細胞毒效應，各細胞毒藥物的IC<,50>降低程度與octreotide濃