生長(zhǎng)抑素類似物聯(lián)合化療藥物對(duì)胃癌細(xì)胞系抑制作用的研究.pdf

1、目的胃癌是我國最常見的消化道的惡性腫瘤之一，發(fā)病率及死亡率均很高，化學(xué)治療在胃癌的治療中占有重要位置?；煹哪康木褪怯行У匾种坪蜌缥赴┘?xì)胞。但常規(guī)化療藥物存在全身毒性大以及多重耐藥的缺點(diǎn)，常影響化療的效果，因此開展有效的治療方案、加強(qiáng)綜合治療的研究是十分必要的。生長(zhǎng)抑素(SST)能夠聚集在生長(zhǎng)抑素受體(SSTR)陽性的正常細(xì)胞和癌細(xì)胞內(nèi)，既可作為經(jīng)典的內(nèi)分泌激素經(jīng)血循環(huán)起作用，也可以通過局部調(diào)節(jié)或作為神經(jīng)遞質(zhì)起作用，同時(shí)又具有選擇性強(qiáng)

2、、低毒的抗腫瘤特性，因此探討SST與化療藥的協(xié)同效應(yīng)對(duì)臨床治療有指導(dǎo)意義。本實(shí)驗(yàn)旨在研究生長(zhǎng)抑素類似物(SSTA)—奧曲肽(OCT)聯(lián)合細(xì)胞毒化療藥物對(duì)胃癌細(xì)胞生長(zhǎng)的抑制作用及其機(jī)理，為臨床治療胃癌提供依據(jù)。 方法①OCT以1×10-3g/l～1×10-9g/l7種不同濃度和不同濃度的MMC及VCR(1×10-1μg/ml～10μg/ml)分別加入胃癌細(xì)胞培養(yǎng)液中，用MTT比色法分析其對(duì)胃癌細(xì)胞增殖的影響。以1×10-5g/l0

3、CT聯(lián)合MMC或VCR(取小于IC50的三個(gè)濃度1μg/ml、2.5μg/ml、5μg/ml)應(yīng)用MTT比色法分析對(duì)胃癌細(xì)胞增殖的影響。 ②運(yùn)用免疫組化方法檢測(cè)細(xì)胞凋亡調(diào)節(jié)基因p53、Bcl-2在OCT(1×10-5g/l)聯(lián)合MMC或VCR(5μg/ml)處理后的胃癌細(xì)胞中的表達(dá)。 ③應(yīng)用流式細(xì)胞儀檢測(cè)OCT(1×10-5g/l)聯(lián)合MMC或VCR(5μg/ml)對(duì)胃癌細(xì)胞細(xì)胞周期的影響。 結(jié)果1對(duì)胃癌細(xì)胞增殖

4、的影響OCT濃度為1×10-5g/l時(shí)，對(duì)胃癌細(xì)胞SGC-7901的抑制率最大，為20.9％，與對(duì)照組相比有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)；OCT聯(lián)合MMC(5μg/ml)的抑制率為45.8％，與單用MMC之間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)；OCT聯(lián)合VCR(5μg/ml)的抑制率為42.3％，與單用VCR之間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)；在MMC與VCR濃度相同時(shí)，OCT+MMC對(duì)胃癌細(xì)胞SGC-7901的抑制大于OCT+VCR，但

5、差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。 2對(duì)胃癌細(xì)胞中p53及Bcl-2蛋白表達(dá)的影響①OCT、MMC、OCT+MMC、VCR、OCT+VCR等治療組表達(dá)p53的陽性細(xì)胞指數(shù)分別為20.4％、8.9％、9.03％、24.8％、30.8％，與對(duì)照組相比均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)； ②OCT、MMC、OCT+MMC、VCR、OCT+VCR等治療組表達(dá)Bcl-2陽性細(xì)胞指數(shù)分別為12.9％、6.7％、5％、18.5％、20.2

6、％，OCT、VCR、OCT+VCR等組與對(duì)照組相比無明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，MMC、OCT+MMC等組與對(duì)照組相比均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。 3藥物對(duì)胃癌細(xì)胞細(xì)胞周期的影響OCT可以引起細(xì)胞周期中G2/M期的細(xì)胞比例增加，但與對(duì)照組相比無明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)；OCT+MMC可以引起細(xì)胞周期中S期的細(xì)胞比例增加，G0/G1期的細(xì)胞比例減少，與對(duì)照組相比均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)；OCT+VCR，OCT可

7、以引起細(xì)胞周期中G2/M期的細(xì)胞比例增加，G0/G1期的細(xì)胞比例減少，與對(duì)照組相比均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。 結(jié)論OCT上調(diào)p53、下調(diào)Bcl-2的表達(dá)，同時(shí)阻滯細(xì)胞于G2/M期而抑制胃癌細(xì)胞的增殖。對(duì)胃癌細(xì)胞的抑制效果，聯(lián)合應(yīng)用OCT與MMC或VCR高于同等濃度的MMC或VCR。OCT聯(lián)合MMC可以增強(qiáng)MMC下調(diào)Bcl-2的作用，同時(shí)使MMC對(duì)p53的下調(diào)作用減弱，并阻滯細(xì)胞周期于S期；OCT聯(lián)合VCR可以增強(qiáng)上調(diào)p53